沙利度胺对博来霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制.pdf

目 录 …………………………………………………………………………………………·l …………………………………………………………………………………………·4 沙利度胺对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及机制 …………………………………………………………………………………………·8 与方法……………………………………………………………8 结果………………………………………………………………………………………··14 附图…………………………………………………………………………“17 附表………………………………………………………………………………………·28 讨{仑………………………………………………………………………………………··30 结论………………………………………………………………………………………··33 参考文献……………………………………………………………一33 综述沙利度胺与肺纤维化……………………………………………“37 致谢………………………………………………………………………………………………48 个人简历…………………………………………………………………一49 目的：肺间质纤维化是一种顽固且死亡率极高的肺疾病。其包括一组 以进行性、不可逆的由瘢痕形成引起的肺结构破坏为特征的肺部疾病，最 终导致器官功能失常，气体交换障碍，而死于呼吸衰竭。特发性肺纤维化 (IPF)是肺间质纤维化中最常见，致死率最高的类型，诊断后平均生存 三至五年。这反映了缺乏有效的治疗方法来改变疾病的进程。IPF发病机 制仍为未知，并且尚无有效的治疗措施。目前规范的包括皮质类固醇和细 胞毒素剂的抗炎治疗疗效很小，因此，迫切需要一种新的治疗方法。沙利 度胺具有抗炎、免疫调节和抗血管生成的作用。目前已经证实沙利度胺能 够减轻大鼠中博来霉素诱导的纤维化，其明确的作用机制尚不清楚。文献 报道，在实验性肺损伤动物模型中，肺损伤后纤维化的减弱伴有血管内皮 生长因子(vEGF)表达的降低，提示抑制新生血管生成可能是其作用机 制，同时动物模型中白介素．6(IL．6)的表达也减少，提示沙利度胺可能 存在多种作用方式抑制了肺损伤后纤维化的进程。 本实验旨在通过测量血清中转化生长因子．Gl(TGF．B1)、血管内皮生 长因子(VEGF)的含量以及肺组织I型胶原蛋白的表达水平，研究沙利 度胺、地塞米松对博来霉素致大鼠纤维化的干预作用，探讨沙利度胺可能 的作用机制。 方法：选取清洁级健康、SD雄性大鼠120只，由河北医科大学实验动 物中心提供，体重2lO士109，适应性饲养一周后，随机分为四组：(1)对 照组：30只，各时间点10只，一次性向气管内注入0．1ml／loog生理盐水， 28天各处死10只；(2)模型组：30只，各时间点10只，一次性向气管内注 模后第1日以沙利度胺与生理盐水配成终浓度为1％溶液，loom眺g灌胃， 中文摘要 各时间点10只，一次性向气管内注入博来霉素A5(5m∥蝇)，在造模成功 天各处死10只。各组大鼠均小心剪断其双侧股动脉，放血处死，并收集血 的浓度。取下大鼠右肺下叶，于4％多聚甲醛溶液中固定，用免疫组织化 学法检测I型胶原的表达，测量并记录每个视野阳性染色的平均积分光密 件处理所得实验数据。 结果： 1分析肺组织病理结果： 模型组：各相同时间点肺泡炎和纤维化严重程度明显高于对照组 (PO．01)，说明动物纤维化模型复制成功。 沙利度胺组：肺泡炎和纤维化严重程度均较模型组减轻：7d、14d、 程度较模型组减轻(P0．05)。 地塞米松组：肺泡炎和纤维化严重程度均较模型组减轻：各相同时间 点，地塞米松组肺泡炎严重程度较模型组明显降低(PO．05)；纤维化程 各相同时间点，地塞米松与沙利度胺组的肺泡炎和纤维化程度均无统 计学意义(PO．05)。 2肺组织I型胶原蛋白的表达：(平均分光密度表示)： 模型组大鼠肺组织I型胶原蛋白含量随造模时间延长逐渐升高，28 天达高峰，7天、14天、28天与对照组、沙利度胺组、地塞米松组相比 差异有统计学意义(PO．01)；沙利度胺组、地塞米松组大鼠I型胶原蛋 白含量呈低水平