濒危物种四眼斑水龟(Sacalia+quadriocellata)的人工繁殖的研究.pdfVIP

摘 要 四眼斑水龟（Sacalia quadriocellata Siebenzock, 1903 ）为濒危等级，其野生种群数 量主要因非法贸易等因素正在急剧下降，有效而彻底的保育措施迫在眉睫。人工繁殖是 该物种保护的有效措施之一。前人对四眼斑水龟的人工饲养均以只能饲养而不能繁育告 终。本课题组从1998 年始对其进行人工饲养繁殖实验，在2004 年前，未发现任何繁殖 现象。作者从 2004 年开始，从生理学、生态学和行为学等角度进行了一系列诱导繁殖 实验和生态养殖实验，首次在人工环境中成功繁殖出子一代四眼斑水龟。分述如下： 激素诱导性行为 对雄性个体进行了促性腺激素释放激素类似物（LHRH-A ）和人 绒毛膜促性腺激素（hCG ）注射实验，注射后使用多媒体数字监控系统对雄性进行行为 观察。实验动物分为4 组：分别注射LHRH-A （1µ g/100 g BW），hCG （200IU ），LHRH-A （1µ g/100 g BW）+hCG （200IU ）和对照组注射生理盐水。实验结果表明：LHRH-A 可 以有效地诱导四眼斑水龟表现性行为，注射 LHRH-A+hCG 的个体发情强度高于 LHRH-A 单独诱导，单独注射 hCG 和生理盐水均不能诱导发情行为；不同浓度（0.5µ g/100 g BW、1µ g/100 g BW、2µ g/100 g BW ）的LHRH-A 配合hCG （200IU ）同时注射， 发情效果无显著差异。本次实验报道了外源注射 LHRH-A 诱导龟鳖类性行为，尽管 LHRH-A 诱导发情行为的作用机制尚未证实，本实验能确定 LHRH-A 能在四眼斑水龟 性腺未完全发育的条件下诱导发情。 激素影响活动节律 为检验LHRH-A 和hCG 诱导对四眼斑水龟活动节律的影响，将 39 只四眼斑水龟分成4 组：低浓度组（6♀，4♂）、中浓度组（6♀，4♂）、高浓度组（6♀， 4♂）和对照组（6♀，3♂），采用不同浓度LHRH-A （0.5µ g/100 g BW、1µ g/100 g BW、 2µ g/100 g BW ）和hCG （200IU ）对动物进行了诱导实验，实验按照10 天为一周期，并 在注射后对其行为进行24 小时的连续跟踪观察，结果如下：激素诱导的个体相对对照组 个体日活动节律无显著差异，年活动节律在季节差异显著，差异主要体现在实验组的雌 雄个体均出现非常明显的求偶交配行为，对照组未发现发情行为；雄性活动、静息、摄 食、其他等行为在四组间没有显著差异，雌性活动、静息、摄食等行为差异极显著，实 验组活动量和摄食时间分配显著多于对照组。低浓度诱导的龟发情强度最大，浓度过高 LHRH-A 的作用受到抑制。 卵泡发育周期 为评估饲养条件下四眼斑水龟卵巢发育周期，于2007 年 1 月~2008 年5 月，利用超声波检测（使用韩国产Medison SSA 8800 型彩色多普勒超声诊断仪配合 I 阴道探头）每月检测8 只雌性四眼斑水龟的腹股沟区域，检测卵黄卵泡（包括生长卵泡 和排卵前卵泡[0]）、闭锁卵泡和输卵管卵的大小和数量。结果表明：四眼斑水龟卵巢卵 黄卵泡数目和大小呈明显的周期性变化，检测到的卵黄卵泡长径范围为 4 ～24mm （n=186 ）。8 月份环境温度开始下降，此时卵泡数目开始增多，卵泡长径逐渐增大，至 12 月份排卵前期卵泡数量达最大值，卵巢发育成熟。排卵前期卵泡长径范围为 19～ 24mm （n=56 ），最大排卵前期卵泡出现于12 月。排卵时间是 1 月至3 月。闭锁卵泡长 径范围在10～20mm （n=14 ）之间，仅在10 月至次年3 月能检测到少数的闭锁卵泡。 激素诱导卵泡发育 在四眼斑水龟卵泡发育期（8-10 月），将12 只雌性四眼斑水龟 采用LHRH-A 、HCG 对动物进行卵泡发育诱导试验，采用B 超和X 光检测技术检查龟 卵的发育情况。发现实验组的雌性个体出现怀卵现象，并成功产下受精卵，而对照组也 未出现怀卵现象。在前一次实验的基础上，使用 18 只雌性个体，分成3 个组，每组 6 只个体：低浓度组（LHRH-A 0.5ug/100g BW, hCG 200IU ），高浓度组（LHRH-A 8ug/100g BW, hCG 200IU