橘青霉全局性调控因子LaeA相互作用蛋白地研究.pdfVIP

目 录 摘要……………………………………………………………………………………I Abstract…………………………………………………………………………………………………………．V 第一章 综述………………………………………………………………………．1 1．1．丝状真菌全局性调控因子LaeA……………………………………………1 1．1．1全局性调控因子LaeA的发现………………………………………．1 1．1．2 LaeA对丝状真菌的全局性影响……………………………………．．2 1．1．3 LaeA是一种毒力因子………………………………………………4 1．1．5 LaeA其他方面的研究………………………………………………．．7 1．1．6橘青霉中LaeA………………………………………………………．7 1．2丝状真菌LaeA相互作用蛋白的研究……………………………………．．7 1．2．1 Lae～VeAvelB三聚复合体的发现…………………………………8 1．2．2 LaeA相互作用蛋白的研究进展……………………………………．．8 1．3．常用蛋白相互作用方法……………………………………………………10 1．3．1酵母双杂交…………………………………………………………．10 1．3．2 GST．puUdown技术…………………………………………………10 1．3．3免疫共沉淀技术……………………………………………………．11 1．3．4．串联亲和纯化技术…………………………………………………11 第二章 绪论………………………………………………………………………13 2．1研究意义……………………………………………………………………13 2．2课题的提出…………………………………………………………………13 2．3研究内容……………………………………………………………………13 2．4技术路线……………………………………………………………………14 第三章实验材料与方法……………………………………………………………15 5 3．1实验材料……………………………………………………………………1 5 3．1．1菌株与质粒…………………………………………………………．．1 3．1．2培养基………………………………………………………………．．15 3．1．3抗生素………………………………………………………………．．15 表3．1．实验所用抗生素……………………………………………………16 3．1．4本课题中所用引物…………………………………………………．16 3．1．5实验试剂……………………………………………………………．16 3．1．6主要仪器……………………………………………………………．17 3．2实验方法……………………………………………………………………17 第四章实验结果与分析……………………………………………………………31 4．1 1 LaeA与VeA体外相互作用探究…………………………………………．．3 1 4．1．1异源共表达原理………………………………………………………3 4．1．3 LaeA与VeA共表达载体构建………………………………………33 4．1．4 LaeA与VeA共表达蛋白纯化………………………