构巢曲霉中Calcineurin及相关蛋白对逆境响应及其形态建成调控机制分析.pdf

摘要 摘要 真菌，其菌丝延伸是所有极性生长中速率最快的模式生物之一，因此是研究决定 曲霉侵染性的极性生长和相关信号通路的良好模式生物． 已有研究表明钙离子信号通路参与调节构巢曲霉的极性生长和形态建成，然 而关于钙离子信号通路的核心调节者calcin矗rill在调节构巢曲霉极性生长和形 态建成方面的作用的认识还很有限。本课题组之前的研究表明，在构巢曲霉中， NDR(姗clear 持过程中形成复合体发挥功能，它们之中任何一个缺失，都能够导致菌丝极性生 长的缺失和形态缺陷。进一步研究表明，这种极性缺陷渗透逆境条件下可以恢复， 然而这种逆境恢复过程依赖钙信号通路。 在本文中，通过遗传学及分子生物学方法我们进一步证明：(1)钙离子信号 系统成员的基因表达水平及蛋白表达水平在在CotA／MobB缺陷菌株在渗透逆境 中恢复极性生长的过程表达量增高，说明钙离子信号通路确实参与了逆境恢复的 过程。其中钙调磷酸酶calcineurin的作用尤其重要。不仅参与了逆境恢复过程的 对基因表达的了解作用不仅仅是通过C以来完成的，即在逆境响应过程中，C以 不是calcill砌n唯一的下游靶蛋白。(3)通过同源比对找到构巢曲霉中预测的 a『计、Nacl 并具有N端信号肽及calcinel】rin结合位点，CdaA缺陷菌株对E叽A、C 结合序列和N端信号肽， RT_PCR结果显示，F叩A确实对钙离子信号通路各组 性与野生型相似；触以具有N端信号肽及跨膜序列，并具有棕榈酰化酶活性， Calconour WKte和CongoRed对FapA缺失菌株和触缺失菌株以及它们与 在维持细胞壁完整性方面发挥了一定的作用，且在此过程中，它们的功能具有相 关性。 曲霉的极性生长与其侵染性相关，通过对CdaA，FapA和灿dA在维持细胞 4 摘要 正常极性生长、形态建成及离子稳态等方面的作用的研究，可以进一步阐明曲霉 与侵染性相关的极性生长的分子机制，为治疗真菌疾病提供理论基础。 关键词：calcine证n，钙离子信号通路，迪境，极性生长，离子稳态，构巢 曲霉 Abstract Abstract The、Ⅳell deVel叩edgeneticsystem of彳印P啷刀弧玎施肠玎s口．，zf咖肠玎s)mal【es itanexcellentmodel for of and systemstudyiIlg也e processesgrowlll，e妇blishment mainteI瑚lceof pol砷y． IthaS been calcium an in r印6md也at role si印aliIlgplaysiIIlport习皿t polarized infonnation meef!E．ect ofthe of mo印hogenesis，but calcium concermng keyregulator ines诎lisllInentand signaJi