Apelin-13促进脐带华通胶间充质干细胞分化成血管网.pdfVIP

天津医药2015年6PJ第43卷第6期 595 Apelin-13促进脐带华通胶问充质干细胞分化成血管网 高彦琳 ，陈厚 良 ，张宁坤 ，高连如 ，朱智明 摘要：目的 探索 apelin一13对干细胞定向血管网分化的调控作用。方法 采用组织块贴壁法从人脐带华通胶 组织中分离间充质干细胞，流式细胞仪检测其免疫表型。取第 3代人华通胶间充质干细胞，分别接种于4个培养瓶 中，记为A1、A2、A3、A4组 ，用诱导液诱导7d，每天向4组 中分别加入浓度 0、1x106、10x10 、100x10一mol／L的 apelin一1320IxL，倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况 ，并对其进行血管性血友病因子 (vWF)抗体免疫荧光染色 及 CD31流式细胞学鉴定。使用水凝胶的三维培养基对诱导后的内皮细胞进行培养，并按照原A1、A2、A3、A4组的 顺序重新依次编号为Sl、s2、s3、S4组。每天分别向s1、s2、S3、s4组中加入浓度 0、1x10一、10x10一、100x10 mol／L 的apelin-1320txL。7d后倒置显微镜下观察细胞的形态、生长情况及在三维培养基中形成血管样结构情况。结 果 人华通胶间充质干细胞可以诱导分化为vWF免疫荧光染色阳性的内皮样细胞。随着apelin一13蛋白浓度的增 加 ，CD31阳性表达率也随之升高。显微镜下观察到内皮样细胞在水凝胶的三维培养基中能够形成血管样结构。结 论 证实 apelin-13参与并调控人脐带华通胶间充质干细胞分化形成血管网。 关键词：间充质干细胞；apelin一13；血管生成；三维培养，脐带 中图分类号：R329．2 文献标志码：A DoI：10．11958~．issn．0253—9896．2015．06．005 Apelin一13promotemesenchymalstemcellsisolatedfromWharton’sjellytodifferentiateinto vascularnetworks GAOYanlin，CHEN Houliang，ZHANGNingkun，GAOLianru，ZHUZhiming JClinicalCollegeofNavyMedicine，AnhuiMedicalUniversity,Anhui230000,China；2DepartmentofCardiology, NavyGeneralHospital CorrespondingAuthor E—mail：zhuzhiming6542@sina．corn Abstract：0bjective Toexploretheroleofapelin一13inregulatingstemcelldifferentiationintovascularnet．Meth· ods MesenchymalstemcellswereisolatedfromhumanumbilicalWha~on’sjellyusingtissueadherencemethod．Their immunophenotypesweredetectedbyflowcytometry．Passage3ofWJ—MSCs(Wha~on’sjelly—mesenchymalstemcells) wereinoculatedin4flasks，denotedasA1，A2，A3，A4group．Twentyp．Lofapelin一13atconcentrationsof0，lxl0—610× 10一and100~10一 mol／LwereaddedtoA1，A2，A3andA4respectivelyeachday．Afterbeinginducedfor7days，cellmot· phologyandviabilitywereobservedunderinvertedmicro