6小鼠形觉剥夺性近视视网膜Pax6的表达及其启动子区域CpG岛甲基化的改变.pdfVIP

326 中华眼视光学与视觉科学杂志2015年6月第17卷第 塑 』QP! P!! ：』塑 ! !：!!!： · 论著 ／近视研究 · C57BL／6小鼠形觉剥夺性近视视网膜 Pax6的表达及其启动子区域 CpG岛甲基化的改变 王晓静 陈阿银 刘懋 赵福新 黄芙蓉 周翔天 【摘要】 目的 研究C57BL／6小鼠形觉剥夺性近视形成和恢复期视网膜 Pax6mRNA表达及其 启动子区域 CpG岛甲基化水平的变化情况。方法 实验研究。采用单眼形觉剥夺 (MD)建立 C57BL／6 小 鼠近视动物模 型和恢复期动物模 型 ．将入选的小 鼠按 随机数字表法分为 ：MD 4周实验组 (12只)、 同龄对照组 (12只)；MD 4周再恢复 1周实验组 (6只)、同龄对照组 (NC，6只)。实验前后分别用红 外偏心摄影验光仪检测小 鼠眼球 的屈光状态 ，光学相干断层扫描 (OCT)检测小 鼠的眼轴长度和玻璃 体腔深度 。RT-PCR检测视网膜 Pax6mRNA表达水平 ；用硫化测序聚合酶链式反应 (BSP)检测 C57BL／6 小 鼠视网膜 Pax6启动子区CpG岛甲基化水平 。实验组形觉剥夺眼(MD—T)与对侧眼(MD．C)比较采用 配对 t检验 ，不同组小 鼠比较采用独立样本 t检验 。结果 MD4周后 ，MD—T屈光度 『(一3．27~0．52)D1 与MD—C【(1．13±1．17)D1(=一12．726，P0．01)、NC[(1．65~1．69)D】(拄一6．832，P0．01)相 比明显 向近视方 向 漂移 。MD4周再恢复 l周后 ，实验性近视完全恢复。MD4周后 ，MD—T相对定量值 (0．495~0．247)相 比 MD—C(1．0l1±0．477)(仁一3．16，PO．05)、NC(1．071±0．401)(f=一2．99，P0．05)Pax6mRNA表达水平 明 显下降；而恢复 1周后 Pax6mRNA表达水平恢复到正常对照水平 。MD 4周后 ，MD．TPax6启动子 区 CpG岛甲基化水平与 MD．C、NC比较 ，差异无统计学意义。结论 形觉剥夺性近视 C57BL／6小 鼠视 网 膜 Pax6mRNA表达明显下降，启动子区 CpG岛的甲基化水平无 明显变化 ，提示近视形成可能和Pax6 的下 降相关 ，但这一改变可能不是 由视网膜Pax6启动子 区CpG岛的甲基化变化引起 【关键词】 近视； 视网膜； Pax6； DNA甲基化； CpG岛； 小鼠 Study on mRNA expression and DNA methylation of Pax6 in form -deprived myopia in C57BL／6mice WangXiaojing，ChenAyin，LiuMao，ZhaoFuxin，HuangFurong．ZhouXiangtian． EyeHospitalofWenzhouMedicalUniversity．Wenzhou325027．Cina Correspondingauthor：ZhouXinagtina ，Email：zxt—dr@wz．互，．c A【bstract】Objective Toinvestigatethechangesinrefractionandocularbiometricparameters in monocularform—deprivation myopia，and to investigatewhether myopia developmentisassociated withchangesintheretinallevelsofPax6messengerRNA (mRNA)andtheDNA methylation state in cytosine—phosphate—guanine (CpG)sites in the Pax6 promoter．Methods Experimentalstudy． A diffuserlenswasworn overone eye ofone group ofC57BL／6 mice ofr4 weeks to establish a monocularform deprivation (MD)myopiamodel，andanothergroupworeadiffuserlensfor4weeks． then the goggleswereremoved for 1week to build a recovery mode1．A