CEA串连表位-HSP70融合基因疫苗诱导小鼠的表位特异性免疫应答.pdfVIP

维普资讯 第 34卷 第 2期 吉 林 大 学 学 报 (医 学 版 ) Vo1．34 NO．2 2008年 3月 JournalofJilinUniversity (MedicineEdition) M ar．2008 241 [文章编号] 1671—587X(2008 CEA串连表位一HSP70融合基 因疫苗诱导小鼠的表位特异性免疫应答 安力彬 ，刘力华 ，方艳秋 ，李 丹 ，段秀梅 ，许淑芬 ，李树蕾 ，谭 岩 ，宋 燕。 (1．吉林大学护理学院妇产科护理教研室，吉林 长春 130021；2．吉林大学第一医院中心实验室，吉林 长春 130021；3．吉林大学 中日联谊 医院普通外科 ，吉林 长春 130033) [摘 要] 目的：观察癌胚抗原 (CEA) 串联表位一HSP70融合基 因疫苗诱导 的免疫应答 ，为开发新型肿瘤特 异性基 因疫苗奠定基础 。方法 ：在 已经构建含有变异热休克蛋 白 (HSP)序列的基础上 ，插入重组 CEA 串联表 位的编码片段获得 CEA串联表位一HSP融合基因疫苗。3次肌肉注射免疫 Balb／c小鼠，设立注射生理盐水的阴 性对照组、注射氢氧化铝佐剂混悬 CEA 串联表位 的阳性对照组及注射 pCITriCEAs —mtHSP70的实验组 。 FCM 分析脾脏 T细胞亚群 ；体外培养脾细胞 ，ELISA检测培养上清 中干扰素 7 (IFN7)的相对含量 ；同时测定 小 鼠血清 CEA特异性抗体 的滴度 。结果：阴性对照组脾细胞 中cD3 和 CD4 T细胞分别为 55．1 _--4-6．1 和 30．2 ±4．1 ；实验组脾细胞 中CD3 和 CD4 T细胞分别为 78．7 _--4-9．2 和 48．9 士4．7 ，两组 比较差异 有显著性 (PO．01)。其体外特异性抗原肽诱导 的 IFNy分泌处于本底水平 ，可视为生理性参数 ，体外非特异 性和特异性的 IFNy分泌分别增加 3和 6倍 (PO．01)。血清 中CEA表位特异性抗体滴度 阴性对照组为 0，阳 性对照组 1：500，而融合基 因疫苗免疫组达到 1：4000。结论 ：CEA 串联表位一HSP融合基 因疫苗在体 内诱导 以激发辅助性 T细胞为特征 的免疫应答 。 [关键词] 癌胚抗原；热休克蛋 白70；T细胞 ；抗癌胚抗原抗体 [中图分类号] Q78 [文献标识码] A Inductionofspecificanti-CEA responsesbyDNA vaccinationwith fusionsequenceofCEA repeatepitopesandheterogenousHSP70inmice AN Libin ，LIU Li—hua ，FANG Yanqiu ，LIDan ，DUAN Xiu-mei，XU Shufen ， LIShu—lei，TAN Yan ，SONG Yan。 (1．DepartmentofNursingofGynecologyandObstetrics，SchoolofNursing，JilinUniversity，Changchun130021， China；2．CentralLaboratary，FirstHospital，JilinUniversity，Changchun130021，China；3．Departmentof GeneralSurgery，China—JapanUnionHospital，JilinUniversity，Changchun130033，China) Abstract：Objective ToobservetheimmuneresponsesstimulatedbyinoculationofDNA vaccineencodingafusion proteinofCEA tandem re