第5章_脱毒苗的培育.pptVIP

第四章 脱毒苗的培育 目的与要求： 了解：1、病毒在植物体内的分布及危害。 理解：1、脱毒苗的意义； 2、植物脱毒苗的鉴定、保存、应用 与繁殖。 掌握：1、无病毒苗概念； 2、植物脱毒的原理和方法。 病毒对寄主植物可造成毁灭性危害，导致大幅度减产，甚至全株死亡。 潜隐性病毒侵染植物造成症状不明显的慢性危害，不易被发现，尤其危险。 国内外解决作物病虫害的有效途径是培育无病毒苗，实施农作物无病毒化栽培。 无病毒苗 一.病毒在植物体内的危害及分布 1.危害: 绝大多数植物都可以无性繁殖的, 容易受到多种病原菌的侵染, 体内积累浓度相当高的病毒。 组织和细胞病变 新陈代谢等生理机能受到干扰 外观表现不正常状态 一.病毒在植物体内的危害及分布 病毒的特性及侵染 有性生殖退化、仅用无性繁殖方法繁殖的植物，极易受病毒病的侵染。 大多植物病毒不经种子传播（专化性强的病毒除外）。 病毒在生长旺盛的部位繁殖速度慢。 2）在旺盛分裂的分生细胞中，代谢活性高，竞争抑制了病毒的复制； 3）在植物体内，可能存在着病毒钝化系统，它在分生组织中比其他任何区域具有更高的活性。 4）在茎尖存在高水平内源生长素，也可能抑制病毒的增殖 。 茎尖培养 1）茎尖大小：一般以带1-2片叶原基为好，大小为0.2-0.3毫米为宜，超过0.5毫米时，脱毒效果差。（外植体过小茎尖存活率低） 2）培养基：能使茎尖快速生长、分化的培养基均适于脱毒。 3）前处理：切取茎尖之前，植物材料如经过预处理，如热水或热空气处理、低温处理、药物处理，均可大大提高脱毒效率。 4）培养条件：同一般茎尖培养 5）外植体生理状态：由活跃生长的芽上切取 优缺点： 热处理结合茎尖脱毒培养 脱毒时，最好找出茎原基所带叶原基的数目与生长点（茎尖）大小的相关性，这样在取材时就方便多了 茎尖越小对培养基的要求越高，剥离技术要求越高，成功率越低。 微体嫁接法(micrografting) 脱除病毒的关键： ①要求剥离技术很高； ②需要考虑砧木和接穗对营养组成的不同要求； ③与接穗的取材季节有密切关系（苹果4~6月取材嫁接成活率较高。） 植物病毒的症状 植物病毒引起植株的症状是各异的，在观赏植物上由病毒引起外部症状主要有以下几种： （1）变色：褪绿、黄化、花叶、斑驳、红叶等，常见病毒有；香石竹斑驳病毒、黄瓜花叶病毒、芋花叶病毒等。 （2）坏死：常见的坏死是病斑或斑点。有轮斑、环斑、条斑‘条纹等。如香石竹坏死斑点病毒、，凤仙花坏死斑点病毒草等。 （3）畸形：植株可出现矮缩、矮化或叶片皱缩、卷叶、蕨叶等病状。 （4）萎蔫 ：主要是指植物根或茎的维管束组织受到破坏而发生供水不足所出现的凋萎现象。 指示植物indicating Plant法 定义:将一些对病毒敏感、症状特征显著的植物作为指示植物(又叫鉴别寄主),利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法. 3、电子显微镜鉴定法 特点:特异性高\测定速度快 很常用 抗血清的基本原理是通过植物病毒的抗原与抗体的专化结合, 形成可见反应而加以判断。由于植物病毒抗血清具有高度的专化性, 受体植物无论显、隐症, 无论是何种传播介质, 均可通过抗血清反应法准确判断病毒的存在与否, 进行病毒的快速诊断。 2、离体保存 脱毒苗经鉴定后，选择无病原种株系，回接于试管内，可长期保存，是最理想的保存方法。 本章小结 (1)去除植物病毒的方法有热处理法、微茎尖培养法、愈伤组织培养法和茎尖微体嫁接法。前两种是主要方法。 (2)热处理法:为温汤浸渍处理法和热处理法。其中后者因不损伤植物材料，因而是目前最为常用的方法。 (3)病毒主要分布于植物体成熟和衰老的组织及器官中，靠维管束传播。由于茎尖尚未形成维管束，所以茎尖一般是无毒的，可用于组织培养无毒苗。 (4)无毒苗的鉴定方法主要有：①指示植物鉴定法；②抗血清鉴定法；③电子显微镜检查法；④酶联免疫鉴定法。其中，最后-种是目前比较精确和常用的鉴定方法。 （三）无病毒原种的繁殖 可在无毒源和其他病虫害的大田中进行，场地土壤要进行消毒，防治蚜虫、线虫和其他传毒媒介，并建立一套严格的原种繁育制度和栽培管理制度，防止病毒的再次感染。 （一）无病毒苗的繁殖方法 1、嫁接繁殖 2、扦插繁殖 3、压条繁殖 4、匍匐茎繁殖 5、微型薯块繁殖 （二）无病毒苗繁育生产体系 我国农作物无病毒苗繁育生产体系归结为以下模式： 国家级（或省级）脱毒中心——无病毒苗繁育基地——无病毒苗栽培示范基地