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第九章 种子健康检验 张园莉 郑军丽 张瑞珍 姚天茏 庄泽龙 主讲：张 丽 第九章 种子健康检验 第九章 种子健康检验 第九章 种子健康检验 第九章 种子健康检验 由于种子带病的类型和病原物的不同，其病害检验的方法也不相同主要有以下几种： 第三节 种子病原物的检验方法  一、肉眼检验 1. 适用范围 1）混杂在种子间的较大病原体 2）污染大量病菌孢子的种子 3）种子带明显病症的病粒 2 .检验方法 将检验样品分出一半放在白纸或白色搪瓷盘中，检出线虫瘿,麦角菌,黑粉菌球,菌核及病粒,称其重量,计算病害感染率。 3 .注意 1)无病症的种子不一定是无病的种子; 2)不同的病害可以表现类似的症状; 3)同一病害也可表现不同症状。 二、过筛检验 1.适用范围 1)检查混杂在种子内较大的病原体如菟丝子,菌核,线虫瘿和杂草种子等。 2)利用病原体与种子的小的不同,通过一定的筛孔将病原体筛出来,然后进行分类称重。 2.检验方法 将送验样品分出一半作为试样,用规定孔径的筛子过筛； 各层样品倒入白瓷盘内检查,最下层的杂志倒入黑玻璃盘中用肉眼或放大镜检查。 三、洗涤检验 1.适用范围 种子表面带病而肉眼看不见的种子病害。（附着在种子表面的病菌孢子） 2 .检验方法 样品制备：取样（5g）2份于100ml三角瓶内，加蒸馏水10ml,振荡５～10min。 显微计数：悬浮液1000～1500r/min离心3～5min,吸去上清液 ，留1ML沉淀部分，滴于5个载玻片，加盖玻片镜检，每片检查十个视野，并计算每个视野平均孢子数。 四、漏斗分离检验 1.适用范围 检验种子外部所携带的线虫。 检验原理: 种传线虫在水中和有空气的条件下会活化，具有趋水性和向地性，钻出种子游进水中，用显微镜检查水中的线虫。 2.检验方法 将种子用2层纱布包好，放入备好的漏斗内，漏斗需10 ～15cm口径，下口接约10 cm长的橡皮管一根，用弹簧夹夹住； 加水使种子浸没，放在20 ～25℃的环境中浸10～24h； 用离心管接取浸出液，再放在2000r/min的离心机中离心5min,取下部沉淀液置于载玻片上检查线虫。 五、萌芽实验 1.适用范围 种子携带的病菌，无论是在种子表面，还是潜伏在种子内部，只要在种子萌发阶段开始为害或长出病菌的，都可用此种方法进行检验 。 2.检验方法 1）吸水纸法 2）砂床法 六、分离培养检验 1.适用范围 主要用于发育较慢的致病真菌、潜伏在种子内部的、表面的病原菌，也可用来确定病菌潜伏的部位。 2.检验方法 1）数取试样400粒； 2）预处理: 检验种子内部的病原菌时，可用乙醇、0.1%的升汞，或0.1%的次氯酸钠作表面消毒后，用无菌水洗涤； 3）培养: 每个培养皿播10粒种子于培养皿表面，20 ～22 ℃黑暗条件下培养5 ～7d检查； 马铃薯葡萄糖琼脂培养基常用于培养真菌，牛肉汁培养基常用于培养细菌。 七、噬菌体检验 1.适用范围 细菌性病害。噬菌体能造成寄主细菌的破裂和溶解，所以在固体培养基上造成许多透亮的无菌空斑（噬菌斑）。 2.检验方法 样品的制备：称一定重量的种子，根据其传播方式，取其带病的部位进行，加入一定量的灭菌水，浸泡 0.5 ～1h，并不断搅拌，滤纸过滤，取滤液 1ml 3个重复，分别放入3个培养皿中； 测定：加入1ml指示菌液（大于9亿个菌/ml)混匀，3 ～5min后加入10ml溶化并冷却至45 ～50 ℃的固体平板培养基，放入25 ～28 ℃的恒温箱中培养10 ～12h,观察噬菌斑数。 八、接种指示植物法 利用喷雾接种、针刺接种，汁液摩擦接种等适宜的方法接种到指示植物（寄主）。观察指示植物接种后的病斑或幼叶的系统症状，判读是否有病毒病。 九、血清学检验 采用特制的抗血清，利用血清学反应检查细菌、病毒、类菌原体的一类方法。 十、隔离种植检验 有些种子所带的病害或杂草，有时不易发现症状或病原物，需要在生长发育阶段进行病害观察或分析鉴定。 隔离种植应在温室或极为严密的隔离区进行，并在各个生长发育阶