转群体感应淬灭基因attM烟草抗青枯病的研究.PDFVIP

摇 南京农业大学学报摇 2012,35(3):64-70 摇 Journal of NanjingAgricultural University http:/ / 試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試 牛毅,李婷,谷春艳,等.转群体感应淬灭基因attM烟草抗青枯病的研究[J].南京农业大学学报,2012,35(3):64-70 转群体感应淬灭基因attM 烟草抗青枯病的研究 1 1 2 2 1 1 1 1* 牛毅 ,李婷 ,谷春艳 ,杨雪 ,钱国良 ,胡白石 ,刘凤权 ,范加勤 (1.南京农业大学植物保护学院/ 农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室, 江苏 南京210095;2.安徽省农业科学院,安徽 合肥230031) 摘要:自根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)克隆获得attM基因。 采用叶盘转化法,农杆菌介导转化烟草,经过卡那霉素 抗性筛选获得抗性愈伤组织,对其分化产生的植物株系进行PCR、PCR鄄Southern和荧光定量PCR及GUS染色检测分析。 结 果表明:attM基因被成功插入烟草基因组DNA 中。 在转基因株系中均能够表达,相对表达量最大可达125.8,最小为31.0。 以野生型烟草和转pBI121空载体的烟草为对照,分别进行了离体及活体检测试验,结果表明:转attM基因烟草植株对茄科 7 8 -1 雷尔氏菌引起的青枯病抗性显著。 1伊10 ~1伊10 CFU·mL 的青枯菌接种离体叶片,野生型烟草和转pBI121空载体的烟 6 -1 草的中毒面积与接种面积比值为15~25,转基因植株的比值低于3;青枯菌3伊10 CFU·mL 伤根接种盆栽烟草植株 14 d, 野生株和转空载体烟草均青枯死亡,病情指数为100,转基因植株病情指数为31.25。 关键词:转attM基因烟草;青枯病;抗病性 中图分类号:S572;S435.72摇 摇 摇 摇 文献标志码:A摇 摇 摇 摇 文章编号:1000-2030(2012)03-0064-07 Increasing resistance toRalstonia solanacearum in transgenic tobacco by expressing a quorum鄄qunching gene attM 1 1 2 2 1 1 1 1* NIUYi ,LI Ting ,GU Chun鄄yan ,YANGXue ,QIAN Guo鄄liang ,HU Bai鄄shi ,LIU Feng鄄quan ,FANJia鄄qin (1.College of Plant Protection/ Key Laboratory of Integrated Management of Crop Diseases and Pests,Ministry of Education, Nanjing Agricultural University,Nanjing210095,China;2.Anhui Academy of Agricultural Sciences,Hefei230031,China) Abstract:TheattMfragmentwas