红外光谱对苯胺的电聚合及其酶固定分析.pdfVIP

第 2 8卷 第 1期　　　　　　　　　　　　　上海师范大学学报 ( 自然科学版 ) Vol. 28, N o. 1 1 9 9 9年 3 月　　　　　　　　　　 J. of Shanghai Teach ers Univ. ( N atu ral Sci ences ) Mar . 1 9 9 9 红 外 光 谱 对 苯 胺 的 电 聚 合 及 其 酶 固 定 分 析 土 吴霞琴　杨海峰　张　土土 提　要　应用红外光谱和扫描电镜配合进行苯胺在铂金 电极上的电聚合及其葡萄 糖氧化酶 固定化实验条件的探索 .实验结果表明 ,高氯酸根阴离子掺杂的膜经过阴 极化去杂后再 固定酶 ,可以提高 电极对葡萄糖响应的灵敏度和稳定性 . 关键词　红外光谱 ; 扫描电镜 ;聚苯胺 ;葡萄糖传感器 中图法分类号　 O646. 54 0　 引　言 生物传感器制备过程中酶的固定化是关键性的一步 , 以苯胺、吡咯这类导 电高分子聚合 物为载体实施酶在电极上 的固定 已有许多报道 [1～ 3 ] .作者在几种 中性介质 中进行苯胺 的电 化学聚合 的实验结果表 明 ,不同的阴离子掺杂对聚苯胺膜 的结构影响很大 [4～ 6 ] . 其 中 , 以高 氯酸钠作介质 , 即掺杂 了高氯酸根 阴离子 的聚苯胺膜 ,修饰到石英 晶体微天平 ( QCA)的金 电极上构成 的气体传感器 ,对 乙醇、苯和氨等有很好的响应 [7 ] . 本文则报道了以阴离子掺杂 理论指导下在铂电极上进行苯胺的电化学聚合及葡萄糖氧化酶的固定 ,并从红外光谱和扫 描 电镜 的测试结果讨论 了苯胺 电化学聚合的时间、高氯酸钠介质 的浓度等实验条件对 电极 的响应特性的影响 . 1　实验部分 1. 1　实验仪器及试剂 苯胺的电化学聚合用 DGS- 292型恒 电位仪 (上海雷磁仪器厂 )、DCG- 1多功能程序给定 仪和 X- Y记录仪 (上海 自动化仪表二厂 )进行 . 电解 池为 常规 的三 电极体 系 . 铂 片作 研究 电极 ( 5mm× 5mm )和辅 助 电极 ( 8mm× 　　　　　　　　　　 上海市教委科学技术发展基金资助项 目 收稿 日期: 1998-09-02 第一作者吴霞琴 , 女 , 副教授 ,上海师范大学生命和环境科学学院 ,上海 , 200234 　第 1期　　　　　　　　　　　吴霞琴等: 红外光谱对苯胺 的电聚合及其酶固定分析 77 10mm )、饱和甘汞 电极作参 比电极 (以下文 中所示 电位均相对于饱和甘汞 电极的电位 ) .研 究 电极用于电聚合之前按文献 [6 ]所述方法进行预处理 . 红外光谱在美 国 Mat tson 公司 PK 60000 F TIR红外光谱仪上进行测试 ;扫描电镜的测 试在 日本长崎大学工学部江头诚教授 的研究室进行 . 苯胺使用前蒸馏至无色透明;葡萄糖氧化酶为进 口产 品 ( 56U /m g, TOYOBO Co. Ltd. , O SAKA JAPAN ) . 其它试剂均为分析纯 .研究溶液用二次蒸馏水配制 . 1. 2　实验方法 1. 2. 1　葡萄糖传感器 的制作及性能测试 首先在含 4 ( 1 / )的苯胺 ( 0. 1 / )溶液中 ,于 1. 4 下进行聚合 . 然后 ,将此 N aClO m ol L mol L V 电极移至 - 缓冲溶液 中 ( = 5. 0) ,于 - 1. 0 的电位下进行阴极化去杂 . 最后 , HAc N a Ac p H V 在含 2mg /m L 的葡萄糖氧化酶 ( GOD)溶液中 ( p H= 6. 0) ,于 0. 8V 的电位下进行 GOD 的固 定 ( 10min ) . 制得 的电极对不 同浓度葡萄糖溶液 的响应则在 0. 6V , 25℃恒温下、三电极系