胡杨Ring finger E3连接酶PeRH2提高烟草耐旱机制研究.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2015 年，第 34 卷，第 3 期，第 454- 463 页 Gen omics and Applied Biology, 2015, Vol.34, No .3, 454- 463 研究论文 Research Article 胡杨 Ring finger E3 连接酶 PeRH2 提高烟草耐旱机制研究 钱泽勇 张会龙 荆晓姝 申泽丹 邓澍荣 赵瑞 沈昕 * 陈少良* 北京林业大学生物科学与技术学院, 北京, 1000 83 * 通讯作者, xinshen77@126.com lschen@bj 摘 要 近期研究表 明泛素化在植物胁迫响应中扮演一个关键的角色 。作为泛素 - 蛋 白酶体系统(UPS)中的 关键酶 ，泛素 E3 连接酶更是在细胞 的新陈代谢中起着重要 的作用 。本文从胡杨 中克隆了一个 C 端含有 Rin g finger 结构域的蛋白( 152 个氨基酸)编码基因(PeRH2) ，经过序列 比对推断该基 因编码产物为泛素 E3 连 接酶 ，属于 Ring fin ger 家族中的 Ring-H2 构型。研究显示，甘露醇胡杨苗木在 255 mmol/L 甘露醇胁迫下，叶 片 PeRH2 表达量上调 。拟南芥原生质体中瞬时表达融合质粒 pYellow0029- PeRH2 的研究表 明，PeRH2 蛋 白 定位于细胞核。以农杆菌介导法将 转入烟草，SqRT-PCR 结果显示 ， 在转基因烟草 中获得过表 PeRH2 PeRH2 达。在 255 mmol/L 甘露醇处理下，转基因烟草幼苗耐受渗透胁迫 的能力高于野生型和转空载体烟草 。干旱处 理后 ，转基 因烟草的叶片保水力 明显高于野生型和转空载体烟草 ，而叶片相对电导率、MDA 的含量也要低于 野生型和转空载体烟草。因此 ，过表达 PeRH2 能够提高烟草 的抗旱能力。 关键词 胡杨, Ring finger E3 连接酶PeRH2 , 亚细胞定位, 抗旱性 Overexpression of Ring Finger E3- ligase Gene PeRH2 from Populus euphratica in Tobacco Enhances Drought Tolerance in Transgenic Plants Qian Zeyon g Zhang Huilon g Jing Xiaoshu Shen Zedan Deng Shurong Zhao Rui Shen Xin * Chen Shaolian g * College of Biological Sciences and Technology, Beijing F orestry Univer sity, Beijing, 100083 * Corresponding author s, xinshen77@ 126.com l schen@bj DOI: 10 .134 17/j .gab.034.000454 Ab str act Recent studies show that ubiqu itin ation p lays a critical role in regulating p lant resp onses to abiotic stresses . Being as a key enzyme of the ub iquitin 26 S proteasome system (UPS), ubiquitin E3 li gases mediates numerous cellular processes in plant cells. In this stu dy, we cloned a putative PeRH2 gene encoding ubiqu itin E3 ligase from populus euphratica leaves. The PeRH2 gene encodes aprotein (152 amino acids) with a Ring finger motif located at the