大麦Dhn6基因的克隆、蛋白质结构预测与干旱胁迫表达模式.pdfVIP

遗 HEREDITAS(Beijing)2011年3EJ ISSN0253-9772 WWW．chinagene．ca 研究报告 DoI：10．3724／SP．J．1005．2011．00270 大麦Dhn6基因的克隆、蛋白质结构预测与干旱胁迫表 达模式 钱刚 ，平军娇 ，张珍 ，罗素元 ，李学英 ，杨明镇 ，张达 1．遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室，遵义 563000； 2．遵义医学院附属医院介入科，遵义 563000； 3．东北农业大学生命科学学院植物生理学研究室，哈尔滨 150030 摘要：脱水素(Dehydrins，DHNs)是高等植物胚胎发育晚期产生的一类特异多肽，其表达累积程度与植物的发 育阶段、低温、ABA和脱水信号调节等因素密切相关。为了解脱水素的结构与干旱胁迫表达累积反应，文章从 六棱大麦分离到序列全长为 1767bp的 Dhn6基 因，序列分析结果表 明，该基因含一个 92bp 内含子， 90～1759bp为一个开放阅读框，与裸大麦Dhn6基因(GenBank登录号：AF043091)~同源性最高，达93．18％，编 码 523个氨基酸残基的多肽，预测蛋白质的分子量为49．68kDa，理论等电点为8．04。结构分析发现，蛋白质具 有 3个螺旋区，无规则卷 曲构成二级结构的主要组分，亲水氨基酸比例超过 83％；三维结构预测发现，多肽链 自身反向平行排列成松散的亲水索链，K．片段参与兼性 ．螺旋结构域的形成，意味着该脱水素具有束缚 自由 水、稳定细胞膜相结构的功能。实时定量RT-PCR检测结果表明，Dhn6基因的相对表达水平在干旱处理 8h快 速累积，推测DHN6在大麦对干旱胁迫的早期响应中发挥重要功能。 关键词：大麦；Dhn6基因；结构预测；兼性 ．螺旋结构域；干旱胁迫 Molecularcloningandproteinstructurepredictionofbarley(Hordeum vulgrareL．)Dhn6geneanditsexpressionpatternunderdehydration conditions QIANGang，PINGJun—Jiao，ZHANGZhen，LUOSu．Yuan，LIXue．Ying， YANG M ing．Zhen ，ZHANG Da3 1．DepartmentofCellBiologyandGenetics，ZunyiMedicalCollege，Zunyi563000，China； 2．DepartmentoflnterventionalRadioloyg，theAffiliatedHospitalofZunyiMedicalCollege，Zunyi563000，China； 3．LaboratoryofPlantP siology，CollegeofLifeScience，NortheastAgriculturalUniversity，150030，China Abstract：Dehydrins(DHNs)，proteinswithprotectivefunctionsencodedbythelateembryogenesisabundant(LEA)．are differentiallyup-regulatedatthetranscriptionallevelunderenvironmentalsrtessessuchaswaterdeficit．salinity．andlOW temperatureorinresponsetoABA．Datainvolvingproteinstructureandexpressionofdehydrinscouldelucidatehteirfunc． tionalrolesunderdehydrationconditionsinplants．Dhn6geneof1767bDwithna intron(92bp)insix．rowedbarley,a memberofLEA Dl1，wasclonedintopMD18-Tvectorinthepresentstudy．Itshraed93．18％ identitywith rdeum vul- garessp．vulgate(GenBankaccession：AF043091)，encodingaproteincomposedof523aminoacidresidueswithhtepre— dietedmolecularweightof49．68kDaandhtetheoreti