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咯利普兰对糖尿病脑病认知障碍和神经炎症改善作用的研究  中文摘要  咯利普兰对糖尿病脑病认知障碍和神经炎症 改善作用的研究 中文摘要 第一部分目的 观察糖尿病脑病 （DE ）大鼠认知功能及海马组织肿瘤坏死因子 α （TNF-α）、白细胞介素 10 （IL-10 ）表达的变化，探讨炎症在DE 发病机制中的作用。 方法 30 只雄性 SD 大鼠随机分为对照组和糖尿病组，糖尿病组给予高脂饮食 4 周后 按 30mg/kg 腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立2 型糖尿病（T2DM ）大鼠模型，并在 STZ 注射前和实验末测量大鼠体重、空腹血糖和空腹胰岛素。实验末行水迷宫测试评 价两组大鼠认知功能。酶联免疫吸附测定法检测大鼠海马组织的 β-淀粉样蛋白（Aβ） 的浓度，蛋白质印迹法检测TNF-α和 IL-10 的表达，免疫组织化学法观察Aβ、TNF-α 和 IL-10 的表达。结果 糖尿病组大鼠空腹血糖和空腹胰岛素高于对照组，体重低于 对照组（均 P ＜0.001 ）。糖尿病组大鼠在目标象限的探索时间比对照组短（P ＜0.01 ）， 原平台穿越次数相对对照组也较少（P ＜0.01 ），糖尿病组Aβ和 TNF-α表达较对照组 高（均 P ＜0.01 ），IL-10 表达较对照组低（P ＜0.01 ），免疫组织化学染色观察糖尿病 组 Aβ、TNF-α阳性表达明显，IL-10 阳性表达较少。结论 T2DM 能够诱发 DE ，DE 大鼠表现为空间学习记忆能力下降，海马组织 Aβ沉积增多，炎症反应增强，认知的 下降可能与炎症因子表达失衡有关。 第二部分目的 观察磷酸二酯酶 4 （PDE4 ）抑制剂咯利普兰对DE 大鼠的认知下 降是否具有改善作用以及药物对海马组织炎症的影响。方法 45 只雄性 SD 大鼠随机 分为对照组、糖尿病组和咯利普兰组。糖尿病组和咯利普兰组给予高脂饮食加小剂量 STZ （30mg/kg，腹腔注射）诱导 T2DM 模型，并在 STZ 注射前和实验末测量大鼠体 重、空腹血糖和空腹胰岛素。STZ 注射 2 个月后开始给予咯利普兰治疗 23 天 （0.5mg/kg ），治疗 2 周后行水迷宫实验评估大鼠空间学习记忆能力。实验末采用酶 联免疫吸附测定法检测海马组织 Aβ1-40 和 Aβ1-42，蛋白质印迹法分析海马组织 TNF-α、IL-10 、环磷酸腺苷反应原件结合蛋白（CREB ）和磷酸化CREB （pCREB ） 的表达。结果 糖尿病大鼠空腹血糖和空腹胰岛素高于对照组，体重低于对照组(均 P I   中文摘要  咯利普兰对糖尿病脑病认知障碍和神经炎症改善作用的研究  ＜0.001)，咯利普兰组和糖尿病组比较，差异没有统计学意义（P ＞0.05 ）。隐形平台 实验中糖尿病组大鼠较对照组和咯利普兰组，逃避潜伏期延长，目标象限探索时间缩 短，穿越平台次数减少。与对照组比较，糖尿病组和咯利普兰组大鼠海马组织 Aβ1-40 和 Aβ1-42 表达增多 （均P ＜0.01 ），咯利普兰组与糖尿病组相比较没有统计学意义（均 P ＞0.05 ）。糖尿病组TNF-α表达增多，咯利普兰组比糖尿病组 TNF-α表达减少（均 P ＜0.01 ）；糖尿病组 IL-10、CREB、pCREB 表达减少，咯利普兰组表达升高(均 P ＜0.01) 。 结论 PDE4 抑制剂咯利普兰可通过增加 2 型糖尿病大鼠海马组织 CREB 的表达、 CREB 磷酸化水平，从而恢复炎症因子表达的失平衡，进而改善 DE 大鼠的认知功能。 关键词：糖尿病脑病；炎症；咯利普兰；认知障碍 作 者：何 婷 指导教师：钟 远