第八章原核微生物基因表达的调控ppt精品.pptVIP

1）R17 病毒基因组结构 A CP rep 5’ 3’ +RNA 裂解蛋白基因 A基因：附着蛋白基因 CP基因：衣壳蛋白基因 rep基因：复制酶基因 CP基因核糖体结合位点暴露在外。 A 、 CP的其余部分以及rep基因 包裹在二级结构内。 CP A rep 2）CP基因与rep基因的先后翻译 a, 核糖体结合在CP基因暴露 在外的核糖体结合位点。 b, 核糖体在翻译CP基因。 c, 核糖体反复翻译CP基因，直到 CP分子合成达到需要量。 d, CP分子达到2×106 个后，核糖体 才冲开rep 的二级结构，开始翻译 rep基因。 病毒对衣壳蛋白的需 要量一般是较大的。 CP A rep 5’ 3）A基因的翻译 与封闭 rep基因为复制酶基因， R17 病毒复制酶是依赖RNA 的RNA聚合酶。该复制酶复制基因组的过程是： 以正链 RNA为模板合成负链 RNA，然后以负链 RNA为 模板合成正链 RNA， A基因是在以负链 RNA为模板合成正链 RNA的同时被翻译的。 复制酶在以负链 RNA为模板合成正链 RNA的同时， 核糖体以刚刚合成出来的正链 RNA为模板开始A基因的翻译。 复制酶 核糖体 负链 RNA 正链 RNA CP A rep -3’ a +5’ -3’ b +5’ -3’ c d -3’ +5’ 当复制酶和核糖体分别完成A基因的复制与翻译时，RNA立即形成二级结构，将A基因包裹在内，核糖体不能结合上去， A基因翻译就停止了。 2, mRNA寿命的调控作用 原核微生物的mRNA寿命很短，几分钟后就降解。 不同的mRNA有不同的降解速度。 mRNA是蛋白质翻译的模板，寿命越长，翻译越长。 因此， mRNA寿命的长短对基因表达有一定的调控作用。 降解mRNA的酶主要是3’-外切核酸酶。 mRNA的终止子结构以及终止子类似结构均以不同程度 地阻碍3’-外切核酸酶对mRNA的降解作用。 8.2.2 翻译水平的自体调控 翻译水平的自体调控就是自己调控着自己的翻译。 某种蛋白质通过某种手段调控着自身的翻译。 1，释放因子RF2的翻译 RF2的编码序列： 5’ ??????GGGUAUCUUUGACUAC ??????3’ Leu Asp 25 26 值得注意 终止密码子 RF2的编码序列在第25至 第26个密码子之间多了一个 U，该U与后面的GA 组成 了一个终止密码子。 当细胞内RF2充足时，核糖体翻译完第25个密码子后，就停在UGA 处，RF2的翻译就流产，翻译终止。 当细胞内RF2不充足时，正在翻译RF2的核糖体完成了第25个氨基酸 的延伸后，以某种尚不知晓的机制向前滑动一个密码，以 GAC为密 码子翻译出第26个氨基酸（Asp）, 以至最后完成RF2的翻译。 OL1 OL2 OL3 CI OR3 OR2 OR1 cro CⅡ CⅢ N PL PM PR PE λ噬菌体早期基因结构图 λ噬菌体的调节蛋白 2）cro蛋白 第二阻遏蛋白，基因cro的产物， 两亚基。 结合特性：cro蛋白也能结合在O位点上, 分别是 OL1，OL2，OL3； OR1， OR2， OR3。 cro蛋白在这些位点的结合力的区别与CI蛋白正好相反： OR3 OR2 OR1 ； OL3 OL2OL1 cro蛋白与O位点结合阻遏了λ阻遏蛋白的形成。 OL1 OL2 OL3 CI OR3 OR2 OR1 cro CⅡ CⅢ N PL PM PR PE λ噬菌体早期基因结构图 λ噬菌体的调节蛋白 3）CⅡ蛋白 基因CⅡ的产物。 结合特性： CⅡ蛋白单体不稳定，多聚体才有活性。 在CⅢ蛋白的协助下，启动PE 的转录。 受宿主Hfl酶的水解。 4） CⅢ蛋白 基因CⅢ的产物。 抑制宿主Hfl酶对CⅡ蛋白的水解。 CI蛋白-λ阻遏蛋白 cro蛋白-第二阻遏蛋白 CⅡ蛋白+ CⅢ蛋白 N 复制蛋白 Q抗终 止蛋白 裂解蛋白 头部基因 尾部基因 整合酶 切除酶 重组酶 早期基因 晚期基因 OL1 OL2 OL3 CI OR3 OR2 OR1 cro CⅡ CⅢ N PL PM PR PE λ噬菌体的调节位点 1） PL 位置与OL1重叠，左向转录启动子。转录产物有抗终 止蛋白N、 CⅢ蛋白、重组蛋白等。OL1被占据， PL不能启动转录。 N 复制