民猪脂蛋白脂酶基因真核表达载体构建及其调控关系的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 lipase，LPL)是脂肪代谢的关键酶，能催化甘油三酯水解，调节 脂蛋白脂酶(Lipoprotein 脂代谢，在脂质代谢过程中起着重要的作用，是影响猪肉质性状的重要候选基因之一。民猪 是我国的脂肪型地方品种之一，具有肌内脂肪含量丰富、肉质优良，肉味浓郁香鲜等宝贵特 性。因此研究讹基因代谢通路对进一步改良猪肉品质具有重要意义。 PCR方法检测上咒基 脂质体法将重组质粒转染到猪肾上皮细胞(pKl5)中，采用real-time 因超表达前后，从ME／基因、FABP4基因、UCP3基因的mRNA表达变化情况的角度出发， 分析LPL基因与他们之间的协同关系，为研究猪脂肪沉积提供理论资料，为发挥民猪优良的 肉品性能，改善商品猪肌内脂肪沉积提供依据，并为通过基因调控预防和治疗肥胖及相关疾 病的方法进一步确立提供思路和理论依据。研究结果如下： 1)克隆了民猪口·三基因完整编码区序列，大小为1437bp，编码479个氨基酸。其qb666位 C／T变化导致精氨酸缺失。 2)成功构建TpcDNA3．1-LPL真核表达载体，并转染到PK-15细胞中。 3)在猪PKl5中过量表达甜z基因后，MEl和FABP4基因的表达水平出现显著降低 (p，o．05)，UCP3基因的表达水平也有下降的趋势(舢．05)。 关键词民猪：上儿；PK-15细胞；超表达 ABSTRACT Constructionof Cell Vector Eukaryotic Expression and of RegulatoryRelationshipLpL GeneinMin Pig Abstract forthe Lipoproteinlipase(LPL)iskeyenzylnesmetabolismof t circulatingtriacyLglycerols of the TGand the metabolism．Italso an rolein catalyzeshydrolysis regulatesfatty playsimportant isconsideredtobe eandiate meat facilitatinglipoproteinabsorptionZPLgene major geneaffecting withfine meat and intramuscular one is ofthe qlIal毋traits．Minpigs qualityhigh fat(w)content inChina。 excellentlocalbreeds Thisresearchreferencesthe LPL in RT-PCRcloned p