力达霉素对肝肿瘤起始细胞表型的调控作用及机制的研究.pdf

中国医学科学院博士论文 目录 目录 吣Y吣2嬲123609 中文摘要………………………………………………………………………………．4 Abstract………．…．…．………．…………………．………．………．……………．…．…．………．…．………．．7 Abbreviation．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．…．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．】【0 前言…………………………………………………………………………………………………………．11日盯舌…………………………………………………………………………………………………………．11 实验材料与实验方法………………………………………………………………．．14 实验结果………………………………………………………………………………34 第一部分肝癌肿瘤起始细胞表型分析及不同表型microRNA表达差异分析……34 1、 肿瘤起始细胞表面分子标记在不同的肝癌细胞株中的表达情况…………34 2、Huh7细胞不同亚群细胞的分选效率………………………………………。35 3、Huh7细胞中的四个亚群细胞分化能力的比较……………………………．36 6、 CDl33+EpCAM+亚群细胞高表达干细胞相关基因…………………………42 microRNA芯片表达差异及部分验证……………………………………………．48 第二部分力达霉素对肝肿瘤起始细胞的作用及其机制…………………………．．50 1、 体外肝癌细胞球具有肿瘤起始细胞的特性…………………………………50 2、不同化疗药物对Huh7肿瘤细胞球的作用…………………………………．51 3、力达霉素能显著减少分子标记蛋白的表达…………………………………55 4、 力达霉素能降低醛脱氢酶(ALDH)阳性细胞数……………………………s6 中国医学科学院博士论文 目录 6、力达霉素能抑制Il-catenin核转运……………………………………………60 10、体内力达霉素能抑制肿瘤的发生…………………………………………．．64 11、体内力达霉素能减少肿瘤细胞表面分子标记蛋白的表达………………．66 i寸 论………………………………………………………………………………………………………68 结论………………………………………………………………………………………………………．．72 参考文献……………………………………………………………………………73 文献综述…………………………………………………………………………81 致谢…………………………………………………………………………………………………………．91 中国医学科学院博士论文 中文摘要 力达霉素对肝肿瘤起始细胞表型的调控作用 及机制研究 中文摘要 肝癌已经成为全球致死率第五的肿瘤，临床上化疗药物治疗效果不佳，容易引 起复发和转移。近年来，肿瘤起始细胞的提出为肝癌的治疗提供新的理论基础。肿 瘤起始细胞理论认为：肿瘤起源于肿瘤起始细胞，其具有干细胞特性，主要包括自 我更新、引起和维持肿瘤生长、多向分化能力和耐药性。本研究分别从分析人肝癌 Huh7细胞不同表型的肿瘤起始细胞特性，以及力达霉素对Huh7肝肿瘤起始细胞的 作用机制两个方面进行了研究。 目的： 肿瘤起始细胞表型。 2、进一步研究抗肿瘤抗生素力达霉素对Huh7肿瘤起始细胞的调控作用及分子 机制。 方法： 1、首先，我们运用流式细胞法和westernblot法分析比较了四种肝癌细胞株表 面分子标记的表达情况。然后运用流式分选技术，分离出人肝癌Huh7细胞株表型 个亚群。在体外，我们对四个亚群细胞进行了肿瘤起始细胞特性的比较：1)运用 流式细胞技术检测了血清培养条件下不同亚群细胞