不同频率张应变体外培养猪颈总动脉的蛋白组学研究.pdfVIP

Dissertation for MSc Degree of Shanghai Jiao Tong University PROTEOMIC ANALYSE OF ORGAN-CULTURED ARTERY UNDER DIFFERENT FREQUENCIES OF PULSATING FLOW MSc Candidate: Zhenkun Li Supervisor: Professor Zonglai Jiang Department: Biomedical Engineering School: Life Sciences and Biotechnology Shanghai Jiao Tong University Jun 2008 不同频率张应变下体外培养猪颈总动脉 的蛋白组学研究 摘 要 血液动力学 (hemodynamics) 因素在血管重建 (remodeling) 中 起着重要作用。正常人体血管所受到的周期性张应变主要包括频率、 幅度和持续时间 3 个重要参数。周期性张应变加载幅度和时间对血 管重建的影响已有不少报道，但频率对动脉血管重建的影响尚不清 楚。本文采用血管体外应力培养系统，取巴马小型猪的颈总动脉分 别在 0.5 Hz （低频率组）和1.25 Hz （正常频率组）频率的周期性脉 动张应变条件下，培养 24 h ，控制平均流量为 50 ml/min，平均压力 为 120 mmHg。然后，应用双向凝胶电泳结合质谱和生物信息学分 析的比较蛋白质组学方法，比较不同频率作用下颈总动脉蛋白表达 的差异。结果表明，（1）应用双向电泳图谱分析，共发现有 2 倍以 上差异表达（表达上调或下调）的蛋白点有 67 个，其中有 49 个点 在 1.25 Hz 组中表达丰度比 0.5 Hz 组高，有 18 个点在 0.5 Hz 组中表 达丰度比 1.25 Hz 组高；（2 ）质谱分析得到 17 个蛋白点的 PMF 图 谱，搜索 NCBI 非冗余库，获得 9 个较为可靠的蛋白点身份: Crystallin、GRP 78、KIAA0098 蛋白在 0.5 Hz 组高表达，HSP27 、 triosephosphate isomerase 1 、alpha-actin、FOX1 、ATP synthase D chain 、 procollagen-proline 2-oxoglutarate 4-dioxygenase 在 1.25 Hz组高表达； （3 ）体外培养细胞牵拉实验对HSP27 磷酸化蛋白表达的验证表明， 在不同频率张应变作用下HSP27 的磷酸化水平变化与血管体外应力 培养的结果一致，1.25 Hz 频率应力加载促进了血管 HSP27 蛋白表 达。 关键词：血管培养，应力，频率，蛋白组学，热休克蛋白 27 ， 血管重建 PROTEOMIC ANALYSE OF ORGAN-CULTURED ARTERY UNDER DIFFERENT FREQUENCIES OF PULSATING FLOW ABSTRACT The mechanical stimuli from the pulsatile blood flow play a significan role in vascular remodeling. Each kind of cyclic mechanical strain includes at least three elements, magnitude, frequency, and duration. Effects of strain magnitude and exposure time on blood ves