曹雪开题报告PPT精品.pptVIP

* 基于硝酸纤维素膜和手机拍照检测与传输的 快速低成本尿液检测纸芯片的研制 学 生 曹雪 指导教师 周小棉 李难 广州市第一人民医院检验科 2011年3月2日 技术路线 选题依据 研究目标 研究内容 拟解决的关键问题 可行性分析 预期结果 进度安排 实验方法 参考文献 微流控芯片又称芯片实验室（Lab on a Chip），指的是把生物和化学等领域中所涉及到的样品制备、反应、分离、检测等基本操作单元集成或基本集成到一块几平方厘米(甚至更小)的芯片上,由微通道形成网络,以可控流体贯穿整个系统,用以实现常规生物或化学实验室的各种功能的一种技术。 常见微流控芯片的材料 纸材料的一些特殊的优点： 1）成本低廉 适合制备一次性使用的芯片； 2）无需外界动力源 组成纸的纤维素可以吸收水分，表面张力可以作为整个芯片的驱动力； 3）纸具有可燃性 纸质芯片在完成分析功能后可以采取燃烧的方法安全处理，不会留下生物垃圾。 2007年初哈佛大学的Whitesides小组首次尝试将纸作为一种微流控芯片的制作材料。 纸质微流控芯片的研究目前正处于初步发展阶段。 光刻法 喷墨打印法 等离子处理法 绘图法 芯片制作方法 1）Whitesides 小组提出利用拍照手机对纸芯片上的生化反应的显色结果进行拍照并进行远程传输，实现现场检测、远程诊断。 2）Dungchai等人在纸芯片上集成电极，在纸芯片上实现了葡萄糖、乳酸和尿酸的电化学同时检测。 3）Delaney等人在纸芯片上集成了电化学发光检测。 芯片检测技术 硝酸纤维素膜 1.蛋白吸附能力强； 2.孔径仅为0.45μm 3.表面更为光滑和均匀 现场即时诊断（Point of care testing，POCT）又称为床边检测或病人身边检测、家用检验等。 同时具有：空间上的“现场”和时间上的“即时”。 现场即时诊断具有广阔的应用领域，要求分析速度快、操作简便、体积小、便携化等。 现场即时诊断常用的技术包括干化学法测定、 免疫层析和生物传感器等，现在正在发展中的一些现场即时诊断技术还包括微流控芯片、生物芯片、图形分析、纳米技术和表面等离子共振技术等。 尿液常规分析是临床上最重要的三大常规检测项目之一，主要用于泌尿生殖系统疾病、代谢性疾病（如糖尿病等）、肝胆疾病及其他系统疾病的诊断和鉴别诊断、治疗检测及健康普查。 干化学尿液分析仪 BACK 通过应用硝酸纤维素膜作为纸芯片的制作材料，研制出可用于尿液蛋白质、葡萄糖、白细胞、潜血（红细胞/Hb)、亚硝酸盐、pH、比重、酮体、胆红素、尿胆原、维生素C等11项检测的一次性纸芯片，并且利用拍照手机作为检测器，将拍得的图像传输到电脑上，再用软件对其取值进行定量分析或肉眼观察进行定性分析。期望可为边远山区、野外、急救现场等远离中心医院的患者提供新一代价格低廉的即时远程检验工具。 研究目标 BACK 研究内容 1.纸芯片的制备 用喷蜡打印技术制备各种被检项目的试剂储存区、样本分配通道和加样区； 针对不同的检测项目将其试剂加入试剂贮存区，经烘干形成纸芯片。 利用拍照手机作为检测器，并用软件（如Imagepro、Photoshop）对其取值进行定量分析，研究纸芯片各项检测指标的检测灵敏度、线性范围、批间变异与批内变异以及储存有效期； 2.纸芯片的性能检测 3.比对 纸芯片的尿液分析结果与现有的尿11项分析仪的结果进行比对 （尿蛋白质、葡萄糖、白细胞、潜血（红细胞）、亚硝酸盐、pH、比重、酮体、胆红素、尿胆原、维生素C等11项检测） BACK 技术路线 芯片的设计 喷蜡打印与烘烤 试剂加载 手机拍照与定量分析 纸芯片性能考察 与常规分析法进行比对 BACK 纸芯片的制备 1.尿十一项检测用纸芯片初步设计图： 黑色中心圆区为样品加载区； 周边各黑色中心圆区为试剂储存区（反应区或测试区）； 其中左上角质控是指显色剂质控； 放线状线条为进样通道（等长度）。 实验方法 2.喷蜡打印制备硝酸纤维素膜纸芯片 喷蜡打印：首先在电脑上利用绘图软件如Freehand 等设计各种图案，然后用喷蜡打印机在硝酸纤维素膜（Whatman (BA 85, 0.45 μm pore size)）上打印出所设计的图案。 烘烤：将喷蜡打印的硝酸纤维素膜置入125℃ 烘箱中烘烤5 min，让打印的蜡熔化并透过膜形成封闭的疏水围堰。 3.纸芯片检测区试剂的加载与检测原理 维生素C与磷钼酸反应，生成钼蓝。 1μL 磷钼酸 维生素C 尿胆原在酸性溶液中与对二甲基氨基苯甲醛反应，生成红色化合物。 1μL 二甲基氨基苯甲醛 尿胆原 在强