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腺病毒介导的人骨形成蛋白．7基因转染对人牙髓细胞增殖与分化的研究 腺病毒介导的人骨形成蛋白．7基因转染对人 牙髓细胞增殖与分化的研究 专 业：1：3腔临床医学 硕士研究生：秦伟 导 师：林正梅副教授 摘 要 目的：构建人骨形成蛋白一7(humarlmorphogeneticprotein，hBMP．7)腺病毒载 体并制备重组病毒液，检测经腺病毒介导hBMP．7基因转染的人牙髓细胞(dental pulp 殖及向成牙本质细胞分化的调节作用。为进一步开展牙髓暴露基因治疗的体外及 临床研究提供实验依据。 hBMP．7基因的重组穿梭质粒载体，酶切鉴定及测序以证实构建是否成功。采用 位置特异性重组方法构建hBMP．7基因重组腺病毒载体。用脂质体介导 293细胞扩增，纯化制取高滴度重组腺病毒。以相同的方法扩增和纯化Ad．EGFP。 性目的基因的腺病毒感染人牙髓细胞，Western