精索静脉曲张对生精功能的影响及其导致不育机制的探讨.pdf

中文摘要 精索静脉曲张对生精功能的影响及导致不育机制的探讨 摘 要 目的：通过建立实验性精索静脉曲张(VC)大鼠模型，观察睾丸组 织的病理切片，描述睾丸组织，生精细胞及睾丸间质的病理改变，并通过 测定血清睾酮、血清抑制素B的浓度，了解VC对睾丸生精上皮的直接损 害，及机体下丘脑．垂体．性腺轴反馈性调节状况，探讨VC对睾丸组织生 精功能的影响及导致不育的机制。 精索静脉曲张组(试验组)20只，假手术组(对照组)20只。 模型建立：动物模型依据Turner的方法建立：实验组大鼠以10％水 合氯醛(3．33 ml／kg)腹腔注射麻醉，麻醉成功后，取腹正中切口约5cm，切 开全层腹壁，暴露腹腔。确认左侧肾脏，左肾上腺静脉，左精索静脉位置 后，仔细分离左肾静脉，在左肾上腺静脉与下腔静脉之间的左肾静脉处， 放置一根直径约O．8mm的金属杆，用4．O丝线将其与左肾静脉一同结扎， 使静脉直径大约缩小一半。结扎完成后抽出金属杆，可见左肾静脉迅速扩 张。以4．0的丝线缝合伤口。对照组大鼠在显露左肾静脉后只穿线打结， 而不缩窄左肾静脉。以精索静脉最大直径1mm，左右肾重量无明显差别 为模型建立成功标准。 标本采集：术后12周，给与腹腔注射10％水合氯醛麻醉，成功后取 下腹正中切口，暴露双侧肾脏，后采用10mI空针注射器，分别取下腔静 脉血4．5ml，置于离心管内(不抗凝)，待标本凝集后以3000转／分，离心 大鼠脱颈椎法处死，剪除睾丸周围筋膜及附睾，用冷盐水洗净，滤纸吸干 水分，置于10％中性甲醛溶液中固定24小时，后将睾丸切成1．2mm厚薄 片，梯度脱水，石蜡包埋组织块。 检测方法：血清抑制素B的测定采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测， 用酶标仪测定每个样本在450nm波长下的OD值，将吸光度值对照标准 曲线得出每个样本的浓度值。血清睾酮的测定采用Access 中文摘要 ECKMANCOULTERDXI800全自动免疫分析 学发光法)测定，使用B 仪严格按规定流程测定样本血清睾酮浓度。睾丸组织切片后行HE染色， 每张切片随机选取lO个视野，并对视野中的曲细精管生精上皮病理变化 情况作出评分，其平均值为此样本的Johnson评分。 统计学分析：血清睾酮浓度、血清抑制素B浓度及Johnson评分采用 13． 计量资料x+s表示，样本均数的比较利用两独立样本t检验，采用SPSS O软件进行统计分析，以P0．05为具有统计学意义。 结果： l血清睾酮检测结果：实验组SD大鼠术后3月，血清睾酮平均为5．2l± 差异无统计学意义(PO．05)。 2血清抑制素B检测结果：实验组SD大鼠术后3月血清抑制素B水平 明显下降，差异有统计学意义(PO．05)。 3 照组评分9．48±O．28相比，明显降低，差异具有统计学意义(Po．05)。 4睾丸病理改变结果：睾丸组织的病理损伤表现为：l、曲细精管内生精 细胞脱落，实验组SD大鼠睾丸组织此种病变占90％，严重者可发生管腔 堵塞。2、生精上皮基底膜增厚、纤维样和透明变性占到75％；3、睾丸间 质病变，包括睾丸间质组织水肿、间质细胞变性占65％；4、间质血管病 变，包括小动脉管壁增厚、管腔缩小甚至闭塞，小静脉扩张充血及淋巴管 扩张占85％。对照组仅发现两例生精细胞脱落，及一例间质水肿。差异均 具有统计学意义。 ’ 结论： l精索静脉曲张会对睾丸生精组织产生不同程度的损害，而导致生精功能 的降低。 2睾丸组织的损伤可通过使血清抑制素B水平降低，反馈性作用于下丘 脑．垂体．性腺轴，代偿性调节性腺功能。 3睾丸生精功能的维持与血清睾酮的水平未发现直接的依赖关系。 关键词：精索静脉曲张；血清睾酮；血清抑制素B；Johnson评分； 中文摘要 不育 3