暗发酵产氢细菌产氢机理与产氢代谢调控.pdfVIP

厦门大学博士论文：暗发酵产氢细菌的产氢机理与产氢代谢调控 中文摘要 生物制氢主要包括暗发酵产氢、光发酵产氢和光解水产氢三种类型。与其它 两种制氢方法相比，暗发酵产氢速度快、不需要光照、能以多种碳源为底物，可 作为一种优先发展的生物制氢方法。产氢机理和产氢代谢调控是提高暗发酵产氢 能力的关键。本论文以一株兼性厌氧菌——产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca) HPl为材料，系统地研究了暗发酵产氢菌的产氢机理和产氢代谢调控，主要研究 内容与结论如下： 建立了产氢代谢研究的实验方法，研究了K HPl生长和产氢的基本 oxytoca HPl能利用可溶性淀粉、纤维二糖、木糖、果糖、蔗糖、葡萄 特性。足oxytoca 糖等多种碳水化合物生长和产氢；能以硫酸铵、尿素为氮源，培养方法简单，有 较好的发酵生物质产氢的潜力。在产氢系统中通入气体会影响K HPl生 oxytoca HPl产 长和产氢，通入不同气体的产氢能力为：ArN2H2C02。足oxytoca 7．0，通入 氢的最佳工艺条件为：以蔗糖为碳源，硫酸铵为氮源，温度37C，pH 适量氩气。KoxytocaHPl有甲酸产氢和NADH产氢两条途径，其中甲酸途径是 主要途径，NADH产氢途径在通气条件下出现。 阐明了K HPl产氢需要一定 oxytocaHPl甲酸途径的产氢机理。五oxytoca HPl甲酸途径是耗 oxytoca 的跨膜质子电化学势△阳+，pH通过△岫+影响产氢。K HPl含有类似Escherichia 能产氢途径。足oxytoca coli氢酶．3(hvd．3)、氢酶．4 6．5，通过FHL产氢系统，厌氧 (hyd--4)的氢酶，有两套FHL产氢系统；在pH If。 氧化lmol甲酸跨膜转运0．4mol HPl发酵产氢的代谢调控作 应用代谢工程和生化反应动力学，对足oxytoca 了研究。代谢控制分析表明：与野生菌相比，敲除adhE基因所构建的工程菌株 K oxytocaME一3的NADH途径产氢活性提高，甲酸途径的活性不降低，总产氢 量提高9％。adhE基因敲除对产氢影响不大，主要原因是adhE敲除后造成丙酮 酸的乙酰CoA途径的通量相对下降。产氢动力学主要研究底物和代谢产物对足 HPl发酵产氢的影响，构建了产氢抑制动力学模型，模型模拟结果与实 oxytoca 验结果互相吻合。 关键词：Klebsiella oxytoca；产氢机理；甲酸途径产氢 厦门大学博士论文：暗发酵产氢细菌的产氢机理与产氢代谢调控 Abstract as canbeclassified