低剂量辐射细胞效应早期过程及机理研究.pdfVIP

低剂量辐射引发细胞旁效应的早期过程机理研究 摘要 摘要 本论文主要讨论了低剂量a粒子辐射引发细胞旁效应的早期过程及可能的 机理，以及高氯化钠培养环境对低剂量辐射旁效应的影响。 传统的辐射细胞旁效应分析方法由于其技术本身的特点，需要几个小时甚至 十几天后才能获得结果，因此反映了旁效应的较晚期事件，对辐射后短时间内发 利用免疫组化方法标记该蛋白可以检测到辐射发生1分钟时的DSB。利用原位 DNA双链断裂免疫标记的方法，研究结果显示低剂量的a粒子辐射后，可以迅 速引发未辐射的细胞中产生DNA双链断裂，辐射后30分钟时损伤效应达到最 大。培养基转移实验发现受辐射细胞可以在辐射后几分钟(最早可在2．5分钟) 内迅速释放出导致DSB的因子到培养基中，释放量在10分钟时达到最大，说明 辐射引起的细胞旁效应可以在辐射后迅速启动，损伤信号能够通过培养基介导的 方式传递。 使用一氧化氮合成酶抑制剂L-NMMA，以及DAF．FMdiacetate处理受辐射 的培养基供体细胞，使得条件培养基的DSB诱导能力消失，说明受辐射细胞中 产生的一氧化氮对受体细胞中损伤的产生是必需的。电子自旋共振分析以及一氧 化氮特异性荧光染料标记发现a粒子诱导细胞中产生一氧化氮，大部分的一氧化 氮会在辐射后15分钟内产生，释放到培养基中的一氧化氮与时间有相关性，其 释放方式与上述DSB诱导因子释放的趋势具有相似性。此外，培养基转移后会 使受体细胞中产生RNS胁迫，从而导致DNA损伤的发生。因此低剂量辐射旁 效应早期过程的可能机理是：低剂量的a粒子击中细胞后，刺激细胞内c型 当旁效应的细胞间信号分子，一氧化氮通过扩散或直接穿过相联结的细胞膜进入 附近的细胞，提升了未受辐射细胞中的RNS胁迫，从而导致未受辐射细胞中产 生功蛆的断裂，即旁效应发生。 论文还进一步研究了环境因子(氯化钠)对辐射引起的细胞旁效应传递的影 响。使用DSB原位旁效应分析和微核分析分别研究了短时程和较长时程的旁效 应。研究结果显示，在高氯化钠培养环境下，同样剂量(0．2cGy)的a粒子会造 低剂量辐射引发细胞旁效应的早期过程机理研究 成更多的细胞中产生DSB或微核，以及阳性细胞中平均DSB断点数增加，这些 结果说明在高氯化钠环境下细胞对旁效应信号更为敏感。此外，高氯化钠环境会 影响DSB的修复，使旁效应发生后大部分损伤细胞中的DSB长时间存在。对高 氯化钠环境下旁效应的机理进行了初步的研究，发现其机理和正常浓度下旁效应 机理有相似性，一氧化氮在信号传递中都起到了重要的作用。上述这些结果对环 境低剂量辐射的防护以及放射性治疗可能会提供有用的线索。 关键词：低剂量辐射细胞旁效应一氧化氮氯化钠 II 低剂量辐射引发细胞旁效应的早期过程机理研究 摘要 Abstract Themechanismofinitiation oflowdose process a-particle induced—bystander andtheinfluenceof saltto effectwerestudiedinthisthesis． effect high bystander Thetraditional of effectsuchasclonal biologicalendpointsbystander survival， andeta1．reflectedthelateeventswhich mutation，specificgeneexpression happened in．severalhoursor