磁性纳米颗粒介野生型p53基因诱导肝癌细胞凋亡和耐药的研究.pdf

摘 要 目的： 研究表明p53基因在绝大部分肿瘤中存在高突变率，这种突变与 肿瘤细胞的多药耐药有着密切关系。本研究拟探讨采用磁性纳米颗粒 及其耐药的研究。 研究方法： HepG2／5一Fu细胞株对不同抗肿瘤药物的敏感性。 以及对5一Fu的耐受分析。 bcl-xl、bax等基因的表达情况。 (5)制备IONP-PLL纳米颗粒，构建氧化铁磁性纳米转运体系， 分析其生物学效应。 HepG2／5一Fu细胞的杀伤效应。 结果： 其它几种常用化疗药均有不同程度的耐药性，其中对5一氟尿嘧啶耐 药倍数达107．0倍，对紫杉醇的耐药倍数达49．0倍。 u 5-Fu mol／L (2)HepG2细胞中未经5-Fu处理的对照组、30 50IJ ％、 组及1 mol／L5一Fu组的凋亡指数分别为(6．5±1．0) (14．O±4．O)％禾口(20．0±5．O)％：30umol／L5一Fu组禾口150umol／L 5一Fu组与对照组相比，凋亡分别增加了1．2倍和2．1倍，差异具有 u 对照组、30umol／L5一Fu组及150mol／L 5一Fu组的凋亡指数分别 ％、(7．1±2．2) u 为(6．7±0．7) ％和(6．5±2．0)％；30mol／L u 5-Fu组150mol／L5一Fu组与其对照组相比，细胞凋亡变化不明显。 (3)经30u lamol／L mol／L和150 5一Fu处理后，HepG2细胞与 S期、G2／M减少，而 其对照组相比， 呈现明显的GO／G1期增加， HepG2／5-Fu细胞与其对照组相比细胞周期未见改变。 细胞mRNA水平均没有检测到bcl一2的表达。 (5)应用碱沉淀法制成的氧化铁纳米颗粒经葡聚糖修饰后形成 好。在酸性的条件下，IONP具有结合DNA的能力，但是在中性和碱 达98％。在酸性的条件下，氧化铁纳米颗粒可保护DNA不被降解。 复合物对于细胞几乎没有毒性，，但随着IONP-PLL的增加，对细胞的 毒性略有增加。 杀伤效应和时间依赖性杀伤效应，在5一Fu作用下，能发生明显的凋 亡效应。 结论： (1)wtp53基因的突变与肝癌细胞的细胞周期的改变、耐药性 的产生相关，是肝癌细胞HepG2／5一Fu产生多药耐药性的机制之一。 (2)在氧化铁纳米颗粒表面修饰多聚赖氨酸，使氧化铁纳米颗 粒表面能可逆结合生物治疗用的核酸分子，该纳米颗粒能作为高效的 基因转运载体，且毒性小，安全可靠。 (3)以wtp53基因为靶点的肝癌基因治疗有望成为治疗晚期肝 癌的一种新的治疗策略。 关键词：wtp53基因，多药耐药，磁性纳米，基因载体，肝癌 ABSTRACT object： the hasthe rateofmutationin Theresearchindicated p53gene high the tumor，thiskindofmutuationandthetumorcell major change toha