传统乳制品中产-氨基丁酸乳酸菌的筛选、鉴定及发酵条件优化.pdf

摘 要 采用薄层层析法和高效液相色谱法，从分离自传统发酵乳制品中的180株乳酸 M1043(1．4059／L)、WZ20—2(1．1329／L)、Mll-3(1．115 S1一l(0．5819／L)、M5一l·1(O．310g／L)、Mll-2-1(0．225g几)和Mll·l(O．211gnA。 经传统的形态学、生理生化特性及化学特性等分类方法，确定WHll．1、 M10-4．3、M1．2、M1 1-3和WZ20．2等5株菌为乳酸乳球菌乳酸亚种亿．1actis subsp Lactis)， 短乳杆菌(上．salivarius)。 在传统鉴定的基础上，利用分子生物学的方法对菌株WHll．1和M10-4．3进行了 16SrDNA基因序列的扩增与测序，并将结果与乳酸球菌标准菌株的16SrRNA／DNA 基因序列作同源性分析， 建立系统发育树。结果表明，菌株WHll．1与标准菌株三． 1actis Lactis subsp subsp Lactis NCD0604的同源性为100％。结合生理生化等传统鉴定结果及系统发育树，可 Lactis。 将菌株WHl1．1和M10-4．3均判定为L．1actis subsp 试验探讨了培养条件(按种量、起始pH值、培养温度和培养时间)、培养基组成 Laetis 以及外源谷氨酸钠浓度对Llactis WHll．1生成丫．氨基丁酸能力的影响。 subsp 通过单因素试验、响应面试验及正交试验得出其生成丫-氨基丁酸的最佳培养条件为： 接种量4．5％，培养时间96h，培养温度为32℃，初始pH值为6．0：最佳培养基组成 为：复合碳源质量分数为2％(葡萄糖与糊精质量比为3：1)，复合氮源中蛋白胨与 酵母膏的质量比为1：3，总碳氮比为l：2，盐酸吡哆醛质量分数为O．15％，谷氨酸 钠309／L。在上述条件下，发酵液中Y．氨基丁酸含量可达10．78∥L，约为优化前的4 倍。 关键词：丫-氨基丁酸：乳酸菌；筛选；鉴定 The andIdentificationofLABStrainsIsolatedfrom Screening Productswith B Acid and Traditional Dairy 7-AminoutyricProducing their FermentationConditions Optimizing Abstract 9LABstrainswithrelative of acidWerescreened higll productionT-aminobutyric 1 strainsisolatedfromtraditional Thin from80 fermented dairy Layer productsusing