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单环刺蜢体壁胶原蛋白结构和性质的研究 摘 要 单环刺蜢(Urechisunicinctus)广泛的分布在我国的黄渤海沿岸，具有很高的 经济、营养和药用价值。本文以新鲜的单环刺蜢为原料，对其胶原纤维的分布和 形态进行研究，并采用生化分离技术提取未变性的胶原蛋白，并对胶原蛋白的结 构和性质作了深入的研究。 1．经组织切片观察发现单环刺蜢体壁中含有大量的胶原纤维，没有观察到 肌纤维的存在，说明胶原纤维与肌纤维没有发生缠绕。 2．采用低温酸法提取单环刺蜢体壁中的胶原蛋白，经紫外光谱分析表明胶 原蛋白的特征吸收波长位于228nm，初步推断所提取的蛋白为典型的胶原蛋白。 氨基酸组成分析表明其为典型的I型胶原蛋白。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS．PAGE) 结果表明胶原蛋白由两条不同的Q链(0【l和0t2链)、p链和丫链组成，且胶原蛋白 中含有二硫键。傅立叶变换红外光谱(FTIR)分析表明其存在三螺旋结构。热变性 温度(td)和热收缩温度(td分别为33．6℃和67．5C。 3．对胶原蛋白溶液的流变学和功能特性进行分析。结果表明，在实验选择 的剪切速率范围内，不同浓度和不同温度下胶原蛋白溶液的弹性模量G’和粘性 模量G”随着剪切频率的增加而增加，0．5％、O．75％、1．0％和1．25％胶原蛋白溶 液的粘弹性模量与剪切频率的关系位于终止区和平稳区。胶原蛋白溶液在30。C 的条件下，由于分子结构被破坏，G’和G”交点对应的频率较其他温度的高，而 在40。C矛D50。C的条件下，由于胶原蛋白分子的聚集而表现明显的缠结现象。而 且胶原蛋白溶液具有良好的乳化性和乳化稳定性。 4．经扫描电镜观察发现，该胶原蛋白冻干样品为丝状纤维结构，并较好地 保持了三螺旋结构，胶原纤维分子链之间的距离为1．14nm，螺旋结构上相邻氨 基酸残基之间的距离为0．27nm。经肽质量指纹图谱分析发现此胶原蛋白与 gi有良好的同源性，肽匹配度可达到39％。 5．胶原蛋白溶液的聚集行为受溶液质量浓度、pH和离子强度等因素的影响。 当溶液质量浓度高于1∥L时，表现明显的聚集行为；pH7．4接近于胶原蛋白的 等电点，胶原蛋白溶液在此pH条件下容易形成聚集体；离子强度可以延缓胶原 蛋白的聚集，当NaCl浓度为30和60mmol／L时，胶原蛋白溶液形成大的聚集体。 6．采用芘荧光探针法研究了单环刺蝣体壁胶原蛋白的聚集行为，研究结果 表明该胶原蛋白的聚集特性表现明显的浓度效应，存在质量浓度临界点(即临界 聚集质量浓度，CAMC)。通过芘荧光探针Iill3值与溶液中胶原蛋白质量浓度的 对数关系，进一步确定该胶原蛋白溶液的临界聚集质量浓度为0．759／L。 关键词：单环刺蜢；胶原蛋白；性质；结构 onthe I Study structureand i esofCOI from propert agen waI I ofErech／sLIRic／nctus body Abstract Urechisunicinctusisoneofthemost resourcesin importantfishery China， which hasthe andmedicinalvalue．Thedistributionand economic，nutritional high of fiberisstudiedfrom wallofUrechis morphology unicinctus，from collagen body is