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- 2016-01-27 发布于湖北
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聚合酶链式反应创新.ppt
Content of Table 1 定义 2 技术优点 3 原理 4 标准反应体系 5 反应五要素 6 热循环条件的选择 7 反应特点 8 常见问题与对策 9 污染 10 应用 1 定义 在引物指导下由酶催化的对特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。 2 技术优点 特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等 PCR product PCR反应曲线 4 标准反应体系 10×扩增缓冲液 10μl 4种dNTP混合物 各200μmol/L 引物 10~100 pmol 模板DNA 0.1~2μg Taq DNA聚合酶 2.5 u (Mg2+) 1.5 mmol/L 加双或三蒸水至 100ul 5 反应五要素 引物 (primer) 酶 (Taq DNA polymerase) dNTP (dATP,dGTP,dCTP,dTTP) 模板 (template) Mg2+ (magnesium) 5.1 引物 引物是PCR特异性反应的关键 PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA
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