同时检测四种病原菌的PCR方法研析.pdf

山东农业大学硕十论文 中文摘要 食品安全突发事件频率高是近年来食品安全问题的一个显著特点， 在各种食品安全事件中，细菌性食物中毒则是食物中毒的重要因素。常 见的食源性致病菌主要有金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单核增生李斯特 氏菌、致泻性大肠杆菌等。目fji『，国内检测食品中致病菌主要采用传统 的培养方法，其操作繁琐，检测时间较长，通常需要一周才能完成，且 灵敏度较低。近年来，针对某一种或一类致病菌的检验方法被建立起来， 但是一旦检测的方向有误就会造成时间和药品的浪费。因此，急需建立 一种快速有效且通量较高的检测方法。 为建立一种同时检测四种常见动物源致病菌的PCR方法。本研究针 对大肠杆菌的(16s．23s rRNA)基因、金黄色葡萄球菌的(nue)基因、单增 李斯特氏杆菌的(hlyA)基因以及沙门氏菌的(invA)基因分别设计合成 了四对特异性引物，PCR扩增的目的基因片段分别为662 bp、484bp、 372 bp、284bp。试验过程中对多重反应体系中引物添加量、镁离子