酶组织化学应用7创新.pptVIP

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  • 2016-01-28 发布于湖北
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酶组织化学应用7创新.ppt

【作用液】0.1M 琥珀酸钠, 0.1M 磷酸盐缓冲液 PH 7.6 NBT(硝基蓝四唑), 二甲亚砜(DMSO) 【步骤】 1. 新鲜组织低温冰冻切片 2. 作用液15~35 分钟 3. 生理盐水洗 4. Fca(氯化钙Formalin)固定10分钟 5. 入80%乙醇5分钟 6. 甘油明胶封固或脱水、透明、中性树胶封片 【结果】酶活性处为蓝紫色沉淀 小鼠心肌冰冻切片-琥珀酸脱氢酶 X400 2. 乳酸脱氢酶(LDH) 需辅酶的脱氢酶 广泛分布的可溶性酶,为糖原分解的酶系 最适PH 7.4 肝、骨骼肌的酶活性高于心肌 【基本原理】催化乳酸和丙酮酸的互变反应 乳酸盐 + NAD 丙酮酸盐 + (NADH+H+) LDH (辅酶Ⅰ) (还原型辅酶Ⅰ) (二)过氧化物酶 催化各种物质被过氧化氢(H2O2)所氧化 见于乳腺、甲状腺、唾液腺、肥大细胞等 髓过氧化物酶见于中性和嗜酸性白细胞及其前体细胞中,对造血系统疾病

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