大肠杆菌甘露糖异构酶(MI)基因克隆及功能的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 甘露糖异构酶(EC5．3．1．7)(Mannose D一甘露糖之间的异构化反应，是生物法制备甘露糖生产中关键的酶，如用于甘露醇 的工业生产，也能在一定程度上克服生产过程中山梨醇的伴生问题。因此，对该酶 的研究具有广阔的应用前景。 研究发现多种微生物均能产生甘露糖异构酶，包括嗜糖假单胞菌(Pseudomonas 分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)和放射形土壤杆菌(Agrobacteraerogenes) 等。但目前常用制备方法为从生产菌中直接提取，酶的产量不高，应用基因工程手 段得到MI高产菌株具有重要意义。 BL21 本实验从大肠杆菌(Escherichiacoli)JMl09中克隆到朋f基因，并在E．coli (DE3)中得到高效表达：进行了重组菌培养条件的优化；构建了所f酵母穿梭质粒， 进行了复性，这些都为酶法生产奠定了基础，主要结果如下： (1) JM