6-ba和氮素控小麦、棉花叶片衰老的生理机制及衰老相关基因鉴定.pdf

摘要 旱衰是生产中经常发生的限制佟物光合潜力、产量和品质的重要因素之一。深刻 揭示与早衰相关的植物衰老的生理和分子机制，对于进一步提高作物的光合生产力具 有重要的理论价值和实践意义。本项研究在前人基础上，研究了细胞分裂素类物质(6． 苄基嘌呤，6-BA)和氮素调控小麦、端花叶片衰老的生理机制，采用现代分子生物 学技术，对小麦农棉花时片自然衰老以及6．BA和氮素调控过程中的特异表达基因进 行了鉴定。采用基因克隆、表达和遗传转化技术，开展了可能与小麦衰老和抗逆相关 的超氧化物歧化酶(SOD)新型基因的克隆和功能研究。主要研究结果如下： l。对6．BA调控小麦时片衰老特征及其生理机制研究表明，与对照相院，喷施井 源6．BA能维持小麦叶片衰老期间较高的叶绿素含量，增加叶片衰老后期的过氧化氢 酶(CAT)活性，降低细胞的膜脂过氧化程度。上述机制是外源6．BA延缓植株和叶片 衰老的重要生理原因。生产中，应根据小麦的熟期和叶片衰老特征，合理施用外源细 胞分裂素类物质的浓度和数量。 2．低氮处理小麦株高、单株时面积、鲜重和干重均有不同程度的降低。叶绿素a、 b、光合速率、可溶性糖和可溶性蛋囱含量均明显降低。不同供氮水平对细胞膜质过 氧化和叶片衰老程度的细胞保护酶的调控，主要是通过SOD活性和过氧化物酶 (POD)活性共同调控完成的，CAT活性的调控效应较小。研究表明，低氮处理串 糖、氮代谢减慢，可能是叶片结构和功能遭到破坏，进而造成叶片衰老加快的主要原 因之一。 d、30 3．采用eDNA．AFLP技术，在小麦自然衰老15d和45d中，分别鉴定了 9、20和16个特异上调表达基因；以及13、8和碡个特异下调表达基因。利用生物 信息学技术，对上述基因的比对和功能分组表明，上调基因归属于细胞代谢、蛋白质 合成、信号转导、细胞防御和保护4个类别；下调基因归属于细胞代谢、信号转导、 细胞防御和保护3个类别。6．BA处理后15d和30d，分别鉴定了13个和8个上调 特异基因，2个和4个下调特异表达基因。上述基因分别归属予缀胞代谢、蛋白质合 成、信号转导和细胞防御和保护4个类别。低氮处理15d后，分别鉴定了与对照相 比特异上、下调特异表达基因为13个和4个，归属于细胞代谢、转录、蛋白质合成、 信号转导、细胞防御和保护5个类别。结果表明，在小麦的自然衰老过程，以及外源 6．BA和低氮处理调控的时片衰老过程中，存在着复杂的基因调控瘸络和代谢途径， 小麦叶片衰老是通过信号转导调控的多条代谢途径共同作用的结果。 4．与对照(CK)相比，外源6-BA增加了棉花的株高、主茎出生叶数、单株叶 面积和单株干重。6-BA对叶绿素含量、可溶蛋自含量和光合速率也有一定的促进作 用，僵以对易衰型品种33B的促进效应较大，延衰型晶种丰抗6的促进效应较小。 叶片生长中后期活性氧产生和清除之间的平衡能力，可能是改善叶片光合、植株生长 和延缓叶片衰老的重要内在原因。外源施用6．BA，对于延缓生产中易衰型棉花品种 的衰老可熊具有重要作用。 5．以易衰型品种33B和延衰型品种丰抗6为材料，研究了不同氮素水平对棉花 光合和衰老特性的影响。研究表明，在不同氮素水平下丰抗6的光合速率(只)均明 显高于33B。随着处理时闻延长，不同氮素处理下33B和丰抗6的叶绿素鑫、b含量、 类胡萝b素含量和可溶蛋白含量均不断下降，其中，在低氮下，处理中后期丰抗6 的上述参数高于33B。低氮处理下，与33B相比，丰抗6处理中后期具有较高的SOD 活性。不同氮素处理中，丰抗6的MDA含量低于33B，而单株干重和单株叶面积则 高于33B。较低的细胞膜质过氧化程度可能是延衰型品种丰抗6在不同氮素水平下衰 老缓慢的重要生理基础。 6．利用eDNA．AFLP技术，鉴定棉花叶片自然衰老15d和30d与叶片全展(展 后Od)相比的特异表达基因。其中特异上调表达基因为13个和22个，下调表达基 嚣均为6个。分别归属于细胞代谢、转录、蛋自囊合成、蛋自震命运、信号转导和细 胞防御和保护等6个类别。分析发现，衰老信号通过诱发Ca2+信号及其级联传递，可 能介导了棉花叶片的自然衰老进程。6．BA处理后，在叶片衰老期间15d和30d分别 鉴定了12个和6个上调表达基因，以及5个和14个下调表达基因，分别归属于细胞 代谢、转录、蛋自质合成、细艴运输、信号转导、细胞防御和保护及细胞组分霉生等 7个类别。外源6．BA处理可能通过对生