几种农药对鲫鱼脏微粒体P450酶系的影响.pdfVIP

摘要 细胞色素P450酶又称为微粒体混合功能氧化酶(MFO)，是催化药物代谢的主要酶 系，不仅能够催化一些具有重要生理功能的内源性物质如激素、脂肪酸、萜类化合物等 的生物合成代谢，而且参与许多外源性物质包括除草剂、杀虫剂、杀菌剂、药物、环境 污染物及其它有毒物质的生物氧化。现今，对它的研究主要集中在大、小鼠及医药领域， 有关环境指示生物的报道很少，目前还未见农药对鲫鱼P450酶系影响的研究报道。本 文对鲫鱼肝脏微粒体P450进行了初步研究，以为在环境毒理学领域进一步研究应用提 供理论基础。 取健康鲫鱼30尾，分三组每组10尾，用差速离心法、钙沉淀法及聚乙二醇法分别提 取各组鲫鱼肝脏微粒体，并测定微粒体蛋白活性及微粒体中P450活性，采用(日立7020) 全自动生化分析仪测定微粒体蛋白活性，紫外分光光度法测定CYP450酶系活性．结果表 明本实验所建立的三种提取鲫鱼肝微粒体的方法及各方法提取的微粒体中细胞色素 P450活性的检测方法灵敏可靠，重复性好，可用于CYP450的系统研究。 氟吗啉、，氧乐果、阿特拉津及多虑联苯对鲫鱼腹腔注射进行急性毒性试验。结果表 以多氯联苯为受试药物，采用腹腔注射法给鲫鱼连续染毒五天，分别以差速离心法、 钙沉淀法和聚乙二醇法提取鲫鱼肝脏微粒体，测定并比较三种方法提取微粒体的P450 酶系活性，结果显示三种方法提取的微粒体测定的P450及NCCR酶活性有明显的差别， 且差速离心法提取的微粒体测得的P450酶活性最好，存在明显的量效关系。因此，针 对P450测定结果比较三种方法优劣顺序为：差速离心法聚乙二醇法钙沉淀法。 在鲫鱼肝微粒体水平上研究了氟吗啉、氧乐果及阿特拉津等几种药物对鲫鱼肝脏微 粒体P450酶系的影响，试验设六个剂量组。氟吗啉按10mg／kg体重、氧乐果、阿特拉 2fJdx5；各组末次染毒24小时后 津及多氯联苯都按20mg／kg体重剂量腹腔注射染毒，1 杀鱼取肝作进一步试验，结果表明，多氯联苯对P450酶及NCCR酶活性都有明显诱导 作用，阿特拉津也对鲫鱼P450酶表现显著诱导作用，氟吗啉和氧乐果对P450酶系没有 显著影响。 关键词：鲫鱼，肝脏微粒体，细胞色素P450，农药 n Abstract P450 is as．the function knownmicrosomalmixed Cytochromeenzyme oxidase(MFO)， the P450 it themedicinemetabolismof main enzymatic catalyzes system．Cytochrome Callnot somethe functionof enzyme onlycatalyze importantphysiologicalendogenous substancessuchas and in others，moreover hormones，fattyacids，Terpenoids participates material oxidation exogeneticbiological including many andothertoxic