木聚糖酶降解秸做饲料添加剂的试验研究.pdfVIP

y448478 摘 要 扭省是农业大省，每年农作物秸秆产生量为8000多万吨，其中大部分用作 肥料和饲料，目前全省农作物秸秆综合利用率已达40%,部分县达到了90%0但 随着农村经济的发展和广大农民群众生活水平的提高，农村生产和生活方式发生 了较大转变，对秸秆的传统利用方式也随之发生了变化，使得秸秆大量剩余，造 成了资源的严重浪费。而且由于大量秸秆得不到及时和妥善的处置，许多地区采 取大面积焚烧的方式，造成了严重的环境污染。所以，寻找一条经济和环境双赢 的秸秆综合利用方式成了当务之急。 近十几年来，研究发现双歧杆菌在畜禽及养殖动物消化道内起着非常重要的 作用，双歧杆菌的存活量对消化、吸收功能影响非常大，于是人们研制了多种双 歧杆菌制剂。但由于双歧杆菌为专性厌氧菌，对光不稳定，不耐酸、不耐高温， 给工业生产带来一定困难，尽管近年来已分离驯化出耐氧的双歧杆菌，为开发活 菌制剂创造了良好的条件，但其经过胃液 (PHO.9-1.o)、肠液 (PH8.3左右)的 作用，到达肠道的活菌数明显减少。另外，双歧杆菌很脆弱，与抗生素混用，往 往被杀死，存活率不大，因而效果不明显。因此，人们在研究活菌制剂的同时， 对动物体内固有的微生物菌群发生了兴趣，如果能够人为地在饲料中添加一些既 不能为养殖动物自身所利用，又不能为大部分有害菌利用，而只能为双歧杆菌利 用，从而使双歧杆菌增殖的物质，则在效果上会事半功倍。这类微生态制剂称为 双歧因子 (BifiausfactorBF).BF是一大类结构和性质各不相同的促进双歧 杆菌增殖所必需的无毒物质。BF有的是含氮多糖或寡糖，有的是辅酶前体，有 的是粗蛋白或酶类，有的是肤类或核酸成分，有的是氨基酸或维生素类等。 寡糖 (低聚糖)一般是指由2-10个单糖以糖营键联结而成的聚合休。由一 种单糖结合而成的低聚糖称为单低聚糖 (homooligosaccharides)，山两种或两 种以上单搪结合而成的低聚糖称为杂低聚糖 (hetirooligosaccharides)。功能 性低聚糖是由2-10个相同的或不同的单糖以糖营键聚合而成的 (可以是直链， 也可以是曲链)。 低聚糖一般具有稳定的理化性质，其利用价值过去一般也体现在理化性质 上。然而随着新兴糖工业工程的发展，寡链作为某些蛋白质的特殊受体，在细胞 识别、增殖分化、病原体感染等方面的重要作用己被人们所认识，寡糖的生理功 能备受关注。特别是非吸收性寡搪，与肠道菌群具有特殊关系，对调整菌群结构、 维持肠道正常环境、调节肠道功能、提高机体健康水平具有重要作用，得到了大 力研究开发。这类寡糖具有一些共同的特点:难以被胃肠消化吸收，甜度低，热 量低，基本上不增加受体糖脂:具有防止龋齿功能，一般不被龋齿链球菌 (S.mutans)利用，不被口腔酶分解:能够促进肠道内双歧杆菌的增殖，改善肠 道菌群，给机体健康带来一系列有益的变化等。 木寡糖一般是以富含木聚搪的植物 (如玉米芯、蔗渣、棉子壳和鼓皮等)为 原料，通过木聚糖酶的水解作用获得的。由于木聚糖是由D-毗喃木糖以6-1, 4-糖普键联结而成，还有木糖、葡萄糖或半乳糖侧链，其结构上的异质性决定 了它不能为任何单一酶类所彻底分解。细菌、放线菌、真菌都可产生降解木聚糖 的酶类，真菌中以黑曲霉和木霉为主。 木聚搪酶的生产方法有两种:液体发酵法和固体发酵法。目前，人们对液体 发酵生产木聚糖酶条件的研究较多，而固体发酵产酶的研究相对较少。固体发酵 法产酶较之液体发酵有原材料成本低廉、对发酵设备要求较低、操作简便等优点。 而木聚搪酶用作饲料添加剂，采用固体发酵法的优势就更加明显，因为可将发酵 “的产物直接作为固体饲用Olll剂“到饲料中丸尸洲 本文通过对黑曲霉An一了6产酶的研究，利用正交试验法，确定了该菌株固体 发酵的最佳产木聚糖酶的条件:料水比为10:25,鼓皮与玉米芯比为2:8，加入 Mandels盐液，温度为280C，培养96h，初始pH为6.0，使木聚搪酶活山最初的 平均664.40提高到1706.57。这为固体发酵产木寡糖提供了理论依据。在此基 础上，对用该木聚糖酶酶解玉米芯生产木寡糖的工艺条件进行了研究。结果表明， 酶解最佳条件为:小试时粗酶液、缓冲液和样品采用11:3:1(V八1w)的比例， 可得的最高得率超过12%.酶解液经高效液相色谱 (HPLC)分析表明:酶解液中 含有葡萄糖和少量木糖，但没有纤维二糖和木二糖，大部分为三搪以上的低聚糖， 具体为何种低聚糖还有待于进一步