六氯苯厌氧降解群的培养、驯化及其活性分析.pdfVIP

摘要 六氯苯厌氧降解菌群的培养、驯化及其活性分析 专 业：环境工程 博士生：萨如拉 指导教师：贾晓珊(教授) 摘要 六氯苯(HcB)不仅是一种典型的持久性环境污染物，也是一种环境激素类 物质，是斯德哥尔摩公约提出的12种优先控制的持久性有机污染物之一． 本文首先对现有的厌氧污泥进行了HCB驯化；驯化培养期间采用标准血清 瓶实验方法考察了不同聊I化时期的厌氧污泥降解HCB活性的变化。在厌氧污泥 具备较高的HCB降解活性的基础上考察了反应条件对驯化污泥降解HCB活性的 影响，确定了HCB降解反应的优化实验条件；在优化的实验条件下，研究了HCB 的厌氧降解特性以及提高HCB降解活性的方法。其次，采用连续流和间歇式反 应器同时取样分析的方法测定了HCB降解的中间产物，并推测了HCB的厌氧降 解途径。另外，采用平板涂布和划线分离的方法在厌氧培养箱内进行了HCB降 解菌的筛选工作。并采用标准血清瓶实验方法验证分离获得的单菌株对HCB的 降解活性。最后，采用分子生物学方法，对HCB降解厌氧菌群的群落结构进行 了分析。实验结果表明： (1)厌氧污泥经过150d的HCB驯化，对HCB的降解率由驯化前的14．4 ％提高到了62．5％．反应温度对HCB降解活性有显著影响，适宜温度为35℃左 右；初始pH值在5．0-8．0的范围内驯化污泥对HCB的降解活性没有显著影响， 但是有随着初始pH增大而HCB降解活性增加的趋势；与静置条件相比，保持一 定的摇床转速更有利于提高厌氧污泥降解HCB的活性． 摘要 (2)不加入有机碳源时微生物对HCB的降解活性受到严重抑制，HCB的 降解非常缓慢；而加入葡萄糖、甲酸、乙酸和丁酸等有机碳源时，明显促进HCB 的降解．不同有机碳源对提高HCB降解活性方面发挥的作用不同，其中和HCB 的降解直接相关的碳源是乙酸和甲酸。并推测产甲烷微生物对HCB的厌氧生物 降解发挥了重要作用。 (3)厌氧污泥通过共代谢降解HCB。HCB的降解发生在微生物混合菌群中， 依靠的是其协同、共生作用。 (4)通过HCB降解动力学分析，在各种碳源条件下，HCB的微生物降解 均符合准一级反应动力学． (5)葡萄糖添加量影响驯化污泥对HCB的降解活性。葡萄糖浓度在 0-200mg／L范围内，增加葡萄糖加入量时HCB的降解活性有明显的提高；而葡 的比较基本没有变化． (6)血清瓶内葡萄糖浓度一定的条件下，氯化铵(氮源)的投加量对HCB 的降解活性有显著影响，随着氯化铵投加量的减少，厌氧微生物对HCB的降解 活性明显降低，显示出氮源对HCB降解的重要性。 (7)HCB初始浓度为0-1．0mg／L范围内厌氧微生物对HCB均有较好的降 解活性：在三个不同浓度(O．25、0．5和1．0mg／L)条件下，HCB的降解活性分 别为18．76、32．96和37．47鹏·f1·g一(VSS)。 HCB的降解；有葡萄糖存在条件下维生素B12也同样明显促进HCB的降解。葡 萄糖和维生素B12在不同条件下促进HCB降解的强弱顺序为：葡萄糖加维生素 B12只加葡萄糖．只加维生素B12． (9)HCB驯化连续流反应器内存在HCB降解的部分中间产物五氯苯和 1，2^三氯苯，这表明，厌氧混合培养条件下HCB的降解可能是通过脱氯实现的。 并推测厌氧污泥对HCB的降解途径可能包括如下一种：HCB脱氯至五氯苯，再 对氯苯类同系物1,2,4，5．四氯苯和l，2冉三氯苯均有较好的降解活性； (10)分离纯化获得2株菌株，但其对HCB的降解活性不稳定，重现性差， Ⅱ 摘要 不能确定其具备HCB降解能力． 显的差异性；测序结果表明，HCB降解厌氧菌群中有大量的不可培养的菌属， 这些菌属都是优势菌群。 总之，本文在瓢化培养获得HCB降解厌氧微生物之基础上进行了HCB厌氧 降解的影响因素研究，一定程度上揭示了HCB的厌氧降解特性，为受其污染的 土壤或沉积物的人工修复和强化处理提供了科学依据，此外还从分子水平上研究