两性霉素b聚乙醇-聚天冬氨酸苄酯共聚物纳米胶束的制备与性能研究.pdf

摘 要 两性霉素B／聚乙二醇．聚天冬氨酸苄酯共聚物纳米 胶束的制备与性能研究 专 业： 生物医学工程 硕士生： 朱丽君 指导教师：潘仕荣教授 摘 要 两性霉素B(Amphotericin B，AmB)，是由结节状链霉素产生的一种 多烯类广谱抗生素，主要用于系统性真菌感染和深部真菌感染。它与真 菌细胞膜磷脂双分子层上的甾醇发生交换作用，导致细胞膜产生水溶性 孔道，使细胞膜的通透性发生改变，最终导致重要的细胞内容物如钾离 子、核苷酸、氨基酸等外漏而造成菌体死亡。此外，AmB也可通过刺激 巨噬细胞调整自体免疫功能产生杀菌作用。 哺乳动物细胞膜上的甾醇主要为胆甾烷醇，经常使用AmB等多烯 类抗生素，可以使其对含有麦角甾醇囊的亲和力大于对含有胆甾醇囊亲 和力的十倍。多年来临床使用的静脉注射用AmB，一直为去氧胆酸钠和 磷酸缓冲液组成的胶体制剂，该药有许多副作用，最严重的为低血钾和 末梢管状酸中毒，这些严重的毒副作用大大影响了AmB的临床应用。 基于上述原因，国内外众多科学家对AmB的剂型进行了大量研究。 本研究设计了一种两亲嵌段共聚物，其亲水段为聚乙二醇(PEG)，在人体 内不会产生毒、副作用，无免疫源性，疏水段为可生物降解的聚L．天冬 氨酸B．苄酯(PBLA)，其降解产物为内源性物质天冬氨酸，在体内不易产 摘 要 生蓄积和毒副作用，利用两组分形成的嵌段共聚物(PEG．b．PBLA)具亲水 和疏水性为一体，在水溶液中可自组装形成核．壳型结构的纳米胶束系 统，其疏水嵌段构成内核并作为微药库通过化学键合或物理包埋的方式 结合AmB，极大的增加了AmB的水溶性，同时躲避体内网状内皮系统 endothelial (Reticulo system，RES)的俘获，延长药物在血液循环中的时 间。 围绕上述研究目的，本文主要探讨了以下几方面的内容 1．聚乙二醇．聚天冬氨酸苄酯(PEG．b．PBLA)嵌段共聚物的合成 以单甲氧端基聚乙二醇(MeO．PEG)和L．天冬氨酸为原料，合成了一 物的结构进行了表征。结果表明，经阴离子聚合可以生成PEG．b．PBLA 嵌段共聚物，其中PBLA嵌段的优势构象为Q螺旋构象。 2．AmB／PEG．b．PBLA载药胶束的自组装和粒径测定 用超微透析法制备了AmB／PEG．b．PBLA自组装纳米胶束系统，通过 紫外分光光度法验证了胶束对药物的包埋作用，以及测定载药量和包封 率。通过动态光散射(DLS)i煲0定了纳米胶束的粒径及分布。 3．AmB／PEG．b．PBLA载药胶束的体外释放 采用紫外分光光度法测定释药介质中AmB的含量，观察 药胶束具有缓释作用，释药介质的pH对药物的释放有很大的影响，载药 量、胶束粒径对释药也有一定的影响。 4．AmB／PEG．b．PBLA载药胶束的细胞毒性试验 制剂在治疗剂量下对细胞的毒性作用均不明显。 5．AmB／PEG．b．PBLA载药胶束的溶血毒性试验 用溶血率考察了自制AmB／PEG．b．PBLA载药胶束，AmB注射剂， 裹AmB的载药胶束与普通Arab注射剂相比，溶血副作用明显降低，同时，作 为载体的PEG．b．PBLA空白胶束的溶血毒性也低于去氧胆酸钠。 摘 要 6．AmB／PEG．b．PBLA载药胶束的体外抗菌试验 别建立了白色念珠菌，热带念珠菌，烟曲霉，新生隐球菌的微量液基稀释药敏试 菌活性。AmB被PEG．b．PBLA包裹后，明显提高了其抗菌活性。 自组装核．壳型纳米胶束系统，该胶束系统具有良好的载药和缓释作用，低毒性 和好的抗菌活性，使AmB的应用达到高效、低毒的目的。 关键词：两性霉素B(AmB)；PEG．b．PBLA两亲嵌段共聚物； AmB／PEG．b．PBLA载药胶束；细胞毒性；溶血毒性；抗菌活性