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连续小株繁殖大菜msap分析及相关基因表达分析
中文摘要…………………………………………………………………………………………I
英文摘要………………………………………………………………………………………．．III
1前言…………………………………………………………………………………………………………………………1
1．1研究的目的与意义………………………………………………………………………．1
1．2文献综述…………………………………………………………………………………．2
1．2．1春化作用研究现状……………………………………………………………………2
1．2．2
DNA甲基化…………………………………………………………………………．．3
1．2．3春化作用与甲基化的关系……………………………………………………………4
1．2．4
MSAP技术……………………………………………………………………………………………………．．5
1．2．5Real·-Time
qPCR．．．．．．．．．．．．．……．．．．．．．．．．．．．．．．…．．．．．……．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．…．．．．．．．．．．．…．．．．．…．．．．．．．．…．．6
1．3主要研究内容……………………………………………………………………………．7
1．4本试验技术路线…………………………………………………………………………．8
2材料与方法……………………………………………………………………………………9
2．1试验材料…………………………………………………………………………………．9
2．1．1植物材料……………………………………………………………………………．．9
2．1．2分子生物学及生化试剂………………………………………………………………9
2．1．3主要试验仪器…………………………………………………………………………9
2．1．4试验软件………………………………………………………………………………9
2．2植物材料的处理和取样…………………………………………………………………10
2．3试验方法………………………………………………………………………………．．10
2．3．1大白菜的冬性调查…………………………………………………………………．10
2．3．2MSAP法检测大白菜基因组DNA甲基化…………………………………………10
2．3．3甲基化差异性片段的克隆测序与序列分析…………………………………………14
2．3．4大白菜甲基化基因的Real．time
RT-qPCR分析……………………………………．16
3结果与分析…………………………………………………………………………………．19
3．1不同处理大白菜冬性差异分析…………………………………………………………19
3．2MSAP检测大白菜基因组DNA甲基化………………………………………………．．20
3．2．1大白菜基因组DNA的提取…………………………………………………………20
3．2．2大白菜基因组甲基化类型…………………………………………………………．．21
3．2．3大白菜基因组DNA甲基化多态性分析……………………………………………2l
3．2．4不同处理的大白菜基因组DNA甲基化比率分析…………………………………一24
3．2．5大白菜基因组DNA甲基化变化模式………………………………………………．24
3．3甲基化差异片段的克隆测序与序列分析………………………………………………．．25
4．211
CONTENTS
CONTENTS
AbstractinChinese………………………………………………………………………………………………………．I
Abstractin
English．…………．…………………………………………………………………………………………III
1Introduction………………………………………………………………………………………………………………l
1．1 and
Purposesignificance………………………．．………………………………………………………………
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