棉花启动子prm6下游序列克隆及纤维特异基因GhF1的功能研究.pdfVIP

棉花启动子prom6下游序列克隆及纤维 特异基因GhFl的功能研究 姓 名：李艳军(作物遗传育种) 导师姓名：孙杰副教授夏桂先研究员 摘要 在农业上，分离植物具有重要农艺性状的功能基因，并通过转基因技术进行分子育种，对作物 品种的改良具有重要意义。因此，克隆和鉴定与棉花发育相关的基因，作为转化棉花目的基因，是 棉花基因工程育种改良棉花品种的一条良好的途径。本论文中根据已知prom6启动子序列，设计一 杂交对获得的BAC克隆进行鉴定，并将与探针杂交的片断进行亚克隆，通过测序，获得启动子下游 lkb核昔酸序列。采用接头PCR技术又获得1．2kb的下游核苷酸序列。通过同源性比较，在基因库 中没有发现同源基因。 thaliana)是研究植物基因的模式植物，从植物系统发育的角度看，控制由 拟南芥(Arabidopsis 胚珠表皮细胞分化形成棉纤维的机制可能类似于拟南芥等植物中表皮毛的发生机制，因此，近年来 成为棉纤维基因功能研究的模式系统。本研究中构建植物表达载体，将棉纤维特异表达的基因GhFl 分别构建到有35S启动子和E6启动子的PZP载体上，转化拟南芥。筛选转基因拟南芥，通过PCR 鉴定阳性植株，获得转基因株系，发现一些转基因株系植株袁型有所变化，出现结荚位置不规律、 荚小瘪子、植株矮小等表型，推测GhFl可能在棉纤维细胞生长发育过程中起到一定的作用。 于基因操作以及和高等真核生物有许多相似等优点，渐渐地被开发作为一个研究高等生物基因表达 的模式系统。本论文中通过构建裂殖酵母表达载体pREP5N+GhFl，将僦门转入裂殖酵母，挑选 转基因酵母单克隆。经诱导后，与正常酵母细胞相比发现转基因酵母细胞变短，间接证明G*用在 纤维细胞的伸长中可能具有负调控功能。 关键词：棉花；裂殖酵母；拟南芥：纤维特异表达基因；启动子 ofthedownstreamof thecotton Cloning sequnce the and functionalofthe GhFl prom6 analysisgene in specifically cottonfibers expressed Graduatestudent：Li andGenetics) Yanjun(Crop Breeding Academic advisor：AssociateProf．SunJie Prof．XiaGUixian the Abstract：In functional agricultural area,separatinggenepossessingimportantagronomictraits，and molecular have on performing breedingthroughtransgenictechnology,which importantsignificance of characteristics is∞excellent