核桃遗传多样性析及核心种质的构建.pdfVIP

摘 要 核桃是原产于我国的重要于果树种，其种质资源十分丰富，存在许多特异 种质资源，但是对我国核桃属植物遗传多样性的研究尚少。本试验利用AFLP 分子标记技术对普通核桃13l份材料的遗传多样性进行了分析，构建了核桃的 核心种质，并对核桃种间的亲缘关系进行了研究。主要结果如下： 1．确定了适于AFLP分析的核桃基因组DNA提取方法为改良CTAB法， rIlInol，L 其提取液成份为：100 Tris—HCl，pH8．O；20mmol，LEDTA：1．4mol／L mmol，L mm01，L NaCl；2％CTAB：2％PVP40：100B一巯基乙醇和10 Na2S205。 粗提后的DNA经RNase液、苯酚一氯仿各抽提一次，氯仿一异戊醇抽提两次，得 到了浓度大，基本无降解，蛋白质和RNA去除彻底，纯度高、质量好的核桃基 因2目DNA。 2．从126对引物组合中筛选出20对多态性高、条带清晰、分布均匀的引 物组合用于普通核桃品种AFLP分析，共扩增出1643条电泳谱带，平均每对引 物产生约82条谱带，其中1512条为多态性带，多态性比率为92．03％；其余13l 条谱带为所有材料共有，占7．97％。 3．从20对谱带清晰、多态性高的引物组合随机选出8对引物对核桃种间 31个材料进行AFLP分析，共扩出833条电泳谱带，平均每对引物产生约102 条AFLP带，其中14个条带为所有材料共有，占1．68％；其余819条均为多态 性带，多态性检出率为98．32％。在核桃不同种之间AFLP标记的多态性检出率 存在较大差异 13l 4．UPGMA法对20对引物扩增的1643条谱带进行聚类分析，建立r 份供试材料的AFLP树状图，结合各样品问的遗传相似系数对其遗传多样性进 行了分析，揭示了供试材料间遗传背景的相似性及复杂性，为核桃的品种鉴定 和产权保护，提供了理论依据。 5．采用逐步聚类分组法，以多态性带为主要指标，结合形态分类学指标及 地理来源，构建了供试品种的核心种质。 6．通过对核桃种间材料的遗传多样性进行分析，可将核桃属8个种分为4 个组，黑核桃组，野核桃、吉宝核桃和心形核桃组，铁核桃、核桃楸和河北核 桃组，普通核桃组。 关键词：核桃：AF【P银染技术体系：指纹图谱：遗传多样性：核心种质 ofGenetic andEstablishmentof Analysis Diversity CoreConection ofV嗡lnutVarietieswithAFLPMarkers Major：Pom0109y Master：WangHong】【ia ZhihuaProfessor SupervisOr：Zhang Abstract Walnuthas value which inChinaandhasbeen hi曲economic originated cultivatedfora timein resourcesofwalnutis long China．Gremplasm abundant． Inderto scientificbasisforthe and provide of utilizatiOnwalnut