美洲商陆抗病毒白基因遗传转化甘蔗的研究.pdfVIP

中文摘要 甘蔗(勋c砌口，姗lQ历cf，坝M所三．)是我国最重要的糖料作物和经济作物，同时也是一种 重要的能源植物。甘蔗花叶病(SugarC锄eMosaicⅥrus，＆?∽是甘蔗中较为重要的病害之 一，传统的化学防治效果不佳，在我国许多甘蔗品种其发病率接近100％，使得甘蔗的 产量和含糖量降低，严重影响甘蔗的经济效益。利用植物基因工程技术把抗病毒基因导 入甘蔗优良品种中使其得到有效表达从而表现出抗病性是防治甘蔗病毒病最为有效的 途径。 美洲商陆抗病毒蛋白∽ke、Ⅳeed距“imal 册P，．fc口刀口三．)春叶中分离得到的一种单链核糖体失活蛋白，它可以催化水解原核和真核 可以有效的抑制多种非相关病毒，包括植物病毒和动物病毒，它是当前所有的核糖体失 个氨基酸为毒性区，缺失突变体PAP．c没有毒性区，其细胞毒性很低，但仍具有较强的 抗病毒活性。因此，将美洲商陆抗病毒蛋白基因∞印．c)导入高产高糖的甘蔗品种中，使 其在叶片中特异表达，可提高甘蔗广谱的抗病毒能力。 本研究构建了rbcS启动子驱动的美洲商陆抗病毒蛋白基因的植物表达载体 沁L，然后利用“冻融法导入超毒性农杆菌株EHAl05，再通过农杆菌介导法对甘 蔗胚性愈伤组织进行转化，经过PPT抗性筛选，获得了抗性植株75株，对其中的8株 进行PCR检测，有3株呈阳性，初步证明美洲商陆抗病毒蛋白基因已整合到甘蔗的基 因组中。 关键词：甘蔗 美洲商陆抗病毒蛋白 叶片特异表达启动子 遗传转化 Abstract memost andeconolIlic Sugarcane@∞幽钟姗l够’cf撇朋mL．)is iIIlportamtSugar crops， andelseaIl 0n hport趾tenergycrol搭iIIcllina．SugarcaIle kmn如l ofmesc、，e豫di∞嬲esin chemical dise勰e，one sugarcane．T}aditionalpreVention a毹ct on＆^形and也e iIlcidencerateof．S台彬is to100％iIl洫a． weakly Sl唱arc锄e ne砌y nhaS reduCedthe alldeConomic greatly sug牡content，ou印ut win aIl to e髓ctive、Ⅳaypre、，ent吐lis sugarcane谢etiesnlI．0u曲g删c％百nee曲gproVide disease． PokeweedarniViral t11e leaVesof protein(PAP)，isolated丘．0mspring P砂幻概佣 口聊Prf阳门口厶is t0Ⅱle ribosome—ir瞰tiVe c雒 belong sin西e—chain proteinS(R【Ps)．PAP residue6．oma tlle of ademne coIlServed， catalyze specific lligmy hydrolyzing