菠萝种质资源的flp分析与分类研究.pdfVIP

菠萝种质资源的AFLP分析及分类研究 摘 要 菠萝原产于南美，是热带地区的特产果树和经济作物。相对于其他果树，菠 萝的育种研究还比较落后，育种工作效率较低，难以适应菠萝产业化发展的需要。 如种质资源的鉴别与合理分类、杂交育种的早期选择、突变的鉴定与评价都是需 要探讨的问题。本研究于2003年7月至2005年4月在广东省农科院果树所果树 新技术重点实验室首次采用AFLP分子标记技术对39个菠萝种资源进行种质鉴 定、分类及亲缘关系等方面的研究。为菠萝种质资源的评价、分类、利用和选育 种提供理论依据。获得的主要研究结果如下: 1菠萝叶片革质化程度较高，且纤维、多糖、多酚等次生代谢物质含量较多， 严重干扰DNA的抽提或影响其后的AFLP双酶切及其扩增反应，本研究对菠萝 叶片DNA提取进行较深入的研究，找到一种获得高质量DNA的CTAB改良法， 并建立了适于菠萝AFLP分析的体系。 2本研究从FISH-AFLP试剂盒(PSTI/MseI型)64对引物中，筛选出8对AFLP 选择性引物 P-GAA/M-CTA,P-GAC/M-CTG,P-GAC/M-CTT,P-GAG/M-CAT, P-GAG/M=CTA,P-GAT/M-CAT,P-GAT/M-CTA,P-GAT/M-CTC对39份菠萝种质资源 进行了AFLP分析，都得到了清晰的指纹图谱，并且所有品种表现出多态性，说 明AFLP技术在菠萝品种鉴定中的可行性。总共8对引物共获得454个遗传位点， 其中多态性位点332个，多态性比例平均为73.1%，其区分率达到100%0 3根据39份菠萝种质材料在检测的DNA扩增结果进行UPGMA聚类分析，获得 聚类树状图，其相似系数为0.73-0.98之间。结果表明39份菠萝种质之间遗传 关系相对来说比较近，依相似系数0.80的水平，可以将供试的39份菠萝种质分 为4种类型，本研究结果可以作为菠萝分类的理论依据和基础。 4鉴别出广东徐闻果树所菠萝种质基地栽培的夏威夷与无刺卡因;黄金与多汁 均为同物异名。广东省果树所通过组织培养获得的04-1,04-3,04-1。菠萝种质 为杂交品种57-236组培苗的变异新种质。从分子水平上探索出菠萝有性杂交中 亲本性状在杂种第一代57-140,57-236,67-1,67-4等品种的遗传倾向。 关键词:菠萝;AFLP;DNA指纹图谱;聚类分析;分类 AnalysisandClassificationofPineapplebyAFLP Abstract Pineapple,originatedrfomSouthAmerica,hasbecomeanimportantfeatureand economyrfuitintropic.Howeverresearchinthebreedingofnewvarietyofpineapple hasnotbeenwelldevelopedtokeepupwiththepaceofitsindustrializationinin recentyears.Someimportantissues,suchas theclassificationofgermplasm resources,thebreedingwithsexualcrossandearlyselectionofimportantgenesareall importantresearchsubjectstobeaddressed.ThePaperintroducesfirstlyAFLP molecularmarkertechniqueintoresearchinggermplasmidentification、varieties classificationandfamilyrelationshipofpineapplegenusplantsatGuangdongFruit 飞FreeResearchInstitute,GuangdongAcademyofAgriculturalSciencesrfomJuly 2003 toApril2005.Whichprovide foundation forthe evaluation, classification,utilizationandselectionofpineapplegermplasmresources.Themain researchresu