马拉硫磷降解菌筛选及对马拉硫磷的降解.pdfVIP

摘 要 农药在环境中的残留及污染全世界普遍关注的问题，而我国是马拉硫磷生产 和使用大国，使用范围广、使用数量多，加上本身水溶性相比较大的特点，现已 对不同地区土壤与水造成了污染。基于对人类健康和环境的威胁，马拉硫磷在环 境中的残留分析和降解研究，具有实际应用价值。围绕马拉硫磷降解问题，本实 验主要研究以下内容。 1. 从模拟长期使用马拉硫磷农药的土壤中用摇瓶培养富集法和土壤直接富 集法筛选并分离出能够降解马拉硫磷的菌株，共分离出菌株312 株。 2. 由于分离出的312 株菌株在选择培养基固体平板上（含有 500 mg·L-1 马 拉硫磷的无机盐培养基）没有明显的生理特征变化来显示马拉硫磷的降解，所以 利用气相色谱逐个测定分离出的菌株活性。测定结果显示，有4 株菌株对马拉硫 磷有降解活性，菌株编号分别为B20 、I2 、I4 、L19 ，采用20 mg·L-1 马拉硫磷作 为唯一碳源时，在48 h 内的马拉硫磷降解率分别为8.9%、15.4%、27%和87.32%。 3. 经形态、生理生化分析，将B20 、I2 、I4 和L19 这4 株高效降解菌株分 别鉴定为气单胞菌属（Aeromonas ）；埃希氏菌属（Escherichia ）；微球菌属 （Micrococcus ）和短波单胞菌属（Brevundimonas sp. ）。经16S rDNA 序列分析， L19 与基因登录号为AB021415 (Brevundimonas diminuta) 的同源性达98 ％,初步鉴 定 L19 菌株是缺陷短波单胞菌（Brevundimonas diminuta ） 4. 对L19 菌株的降解特性进行了研究: 在20 mg·L-1、30℃、pH6.5 条件下， L19 菌株48h 对马拉硫磷降解率达 87.32%，马拉硫磷农药降解率与降解时间呈 正相关。 5. 研究了L19 菌株的最适生长条件，通过温度单因素试验，从15 ℃、20 ℃、 25 ℃、30 ℃和35 ℃5 个温度中确定L19 菌的最适生长温度为25 ℃；通过pH 单因素试验，从pH 6.0 、pH 6.5 、pH 7.0 、pH 7.5 和pH 8.0 等 5 个pH 中确定L19 菌的最适生长pH 为7.0 ； 关键词：马拉硫磷，缺陷短波单胞菌，筛选，鉴定，降解特性 Ⅰ Abstract The residue and pollutant of pesticides were attended by the whole world. The malathion that are produced and used in large scale in China, has caused pollution in different regions of soil and water due to its widely use scope, excessive quantity and much larger water-solubility than other pesticides. Based on the threaten to the health of human beings and the environment, the study of the residue and degradation of malathion were significantly. On the degradation of malathion, the following contents were performed in the present thesis. 1. A total of 312 strains degrading chlorpyrifos were screened and isolated from soils simulated with residual malathion for a long time. 2. As the isolated 312 strains in selective medium plate (containing 500 mg·L-1 malathion