一种可用于大规模单克隆抗体纯化新型ProteinA填料_陈晓虹.pdfVIP

· · 中国生物制品学杂志 2014 年 2 月第 27 卷第 2 期 Chin J Biologicals February 2014 ，Vol. 27 No. 2 228 ·技术方法 · 一种可用于大规模单克隆抗体纯化的新型 Protein A 填料 1 1 1 1 1 1 1 2 2 陈晓虹 ，吴建 国 ，曹传平 ，唐亮 ，曾贤 ，范佳君 ，李玉彬 ，赵丽丽 ，刘增田 ， 程凡亮 2 ，张继环 2 ，马连明 2 ，宋华 3 ，白文 3 ，鞠佃文 1 1. 复旦大学药学院，上海 201203 ；2. 山东新时代药业有限公司，山东 临沂 273400 ； 3. 上海瀚康生物医药科技有限公司，上海 200433 摘要： 目的 比较不 同型号 Protein A 填料 的性能 ，筛选合适 的 Protein A 填料 ，用于大规模单克隆抗体（简称单抗） 纯化。方法 采用表达 H02 单抗的 CHO 细胞培养上清 ，测试不同供应商 Protein A 填料的蛋白结合载量 ，选择合适 的 填料 ，用于大规模单抗纯化 ；检测宿主细胞蛋白（host cell protein ，HCP）、外源 DNA 及 Protein A 残 留量 ，以评价其纯化 效果 ；检测 Protein A 柱在位清洗 （cleaning in place ，CIP）效果 ，并验证其循环使用次数 。结果 Amsphere Protein A JWT203 填料为合适的 ProteinA 填料 ，H02 单抗大规模纯化后 ，可有效去除 HCP、DNA 及脱落 Protein A ；采用 0. 1 mol／ L NaOH 进行CIP ，经过 300 个循环 ，对 H02 单抗仍保持 80%以上动态结合载量 ，Protein A 脱落无明显增加 ，对 HCP、外源 DNA、聚合体的去除能力无明显改变 ，层析图谱与初始基本一致 ，Amsphere Protein A JWT203 填料的理化性质较稳定 。 结论 AmsphereProtein A JWT203 是一种可用于大规模单抗纯化 的新型 Protein A 填料 。 关键词： 抗体，单克隆 ；纯化 ；Protein A 填料 中图分类号：O657. 7 + 3 R392-33 文献标识码： A 文章编号： 1004-5503（2014）02-0228-07 A novel Protein A resin used for large-scale purification of monoclonal antibody * CHEN Xiao-hong ，WU Jian-guo ，CAO Chuan-ping ，TANG Liang ，ZENG Xian ，FAN Jia-jun ，LI Yu-bin ，ZHAO Li-li ， LIU Zeng-tian ，CHENG Fan-liang ，ZHANG Ji-huan ，MA Lian-ming ，SONG Hua ，BAI Wen ，JU Dian-wen