SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测定蛋白质分子量.pdfVIP

生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 PAGE） SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 PAGE） 测定蛋白质分子量 测定蛋白质分子量 授课教师：周杰 授课教师：周杰 生物秀 专心做 物！ 生物秀 专心做 物！ 生物秀 专心做 物！ 易生物-领先的 物医药商务平台 易生物-领先的 物医药商务平台 易生物-领先的 物医药商务平台 生物秀论坛-学术交流,资源共享,互助社区 生物秀论坛-学术交流,资源共享,互助社区 生物秀论坛-学术交流,资源共享,互助社区 /bbs/ /bbs/ /bbs/ 生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区 /bbs 生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 一. 实验目的 一. 实验目的 学习SDS测定蛋白质分子量的原 学习SDS测定蛋白质分子量的原 理。 理。 掌握垂直板电泳的操作方法。 掌握垂直板电泳的操作方法。 运用SDS测定蛋白质分子量及染 运用SDS测定蛋白质分子量及染 色鉴定。 色鉴定。 生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区 /bbs 生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 二 .实验原理 二 .实验原理 带电质点在电场中向带有异相电荷的电极移动，这 带电质点在电场中向带有异相电荷的电极移动，这 种现象称为电泳。 种现象称为电泳。 电泳分类：移动界面电泳、区带电泳、稳态电泳。 电泳分类：移动界面电泳、区带电泳、稳态电泳。 区带电泳是在半固相或胶状介质上加一个点或一薄 区带电泳是在半固相或胶状介质上加一个点或一薄 层样品溶液，然后加电场，分子在支持介质上或支 层样品溶液，然后加电场，分子在支持介质上或支 持介质中迁移。支持介质的作用主要是为了防止机 持介质中迁移。支持介质的作用主要是为了防止机 械干扰和由于温度变化以及大分子溶液的高密度而 械干扰和由于温度变化以及大分子溶液的高密度而 产生的对流。 产生的对流。 区带电泳使用不同的支持介质，早期有滤纸、玻璃 区带电泳使用不同的支持介质，早期有滤纸、玻璃 珠、淀粉粒、纤维素粉、海砂、海绵、聚氯乙烯树 珠、淀粉粒、纤维素粉、海砂、海绵、聚氯乙烯树 脂；以后有淀粉凝胶、琼脂凝胶、醋酸纤维素膜， 脂；以后有淀粉凝胶、琼脂凝胶、醋酸纤维素膜， 现在则多用聚丙烯酰胺（PAGE）和琼脂糖凝胶。 现在则多用聚丙烯酰胺（PAGE）和琼脂糖凝胶。