新型重组糖蛋白表达载体--盘基网柄菌.pdfVIP

第36卷第4期 工业微生物 Vol-36No．4 2006年12月 Industrial Dec．2006 Micmbi蛔 新型重组糖蛋白表达载体一盘基网柄菌* 陈 杰1， 徐志南¨， 卢英华2， 岑沛霖1 (1．浙江大学材料与化学工程学院生物工程研究所，杭州310027； 2．厦门大学化学与化学工程系，厦门361005) 摘要 近年来，盘基网柄茵作为异源重组糖蛋白表达载体的研究受到了学术界的重视，已经有 多种具有生物活性的复杂糖蛋白成功地得到了表达。通过对表达产物的研究发现，盘基网柄茵具 有各种翻译后加工机制，例如磷酸化、酰基化及形成GPI(糖基磷脂酰基醇)锚点等，具有类似于高 等动物的糖基化修饰能力。与哺乳动物细胞表达载体相比较，盘基网柄菌具有培养成本低廉、细胞 生长迅速及易于大规模培养的优势。盘基网柄茵有可能发展成为一种有重要应用前景的糖蛋白表 达栽体系统。 关键词：盘基网柄茵；糖蛋白；表达栽体；重组表达 自然界大部分蛋白质是糖蛋白，糖蛋白广泛存在 盘基网柄菌(觑c乏娜纠i“优dis∞瑟抛“优)是群居 于植物、动物、细菌和真菌中，是细胞膜、细胞粘液以 生活的变形虫“阿米巴”(A优∞沈8)，属于真菌界粘 及多种连接组织的重要成分。糖蛋白的糖基化结构 具有重要的生物学功能，如免疫原性、溶解度、分子识 包括了孤立的单细胞阶段和表现出高等真核生物典 别及抗蛋白水解作用等均与糖蛋白有密切的关系。 型特点的细胞分异和协作的多细胞阶段。基因工程 糖蛋白中糖结构的改变还是某些疾病的罪魁祸首【1]。 常用宿主细胞和盘基网柄菌对所表达蛋白质的糖基 迄今发现的绝大部分有医学应用前景的蛋白质 化修饰能力及其它特点的比较见表1。从表中可 都是糖蛋白，以促红细胞生成素、粒细胞巨嗜细胞集 见，盘基网柄菌具有与哺乳动物细胞类似的糖基化 落刺激因子以及组织纤溶酶原活化剂为主要代表的 修饰能力、中等生长速率和表达能力、低培养成本及 糖蛋白产品在全球创造了30～50亿美元的年产值。产物释放到胞外等特点，有望成为新型的基因工程 此外大约60种糖蛋白正在研究开发之中。 宿主细胞。 表1盘基网柄茵与各常用表达栽体对比 衣 还 系 巩 盘基网柄菌 大肠杆菌 酵母菌 昆虫细胞 哺乳动物细胞 糖基修饰水平————{冀}——————詈詈詈——————丢-—————里墨堕—————堕墨堕L——{ 注：⑩⑩⑨很适合；◎◎适合；◎一般；◎不适合 1盘基网柄菌培养的主要特点 翳搿篇搿篙乏篇0裟畿 2005年，Nature发表了盘基网柄菌的全基因组测序结果同时还证明了盘基网柄菌与真菌以及后生 国家自然科学基金(N030370039)资助。 作者简介：陈杰(1982～)，男，博士研究生，E—nlail：jet∞场u@yah00．com．cn 。通讯作者。E一唧m：znxu@zju．edu．cn 万方数据 一50— 第4期 陈 杰，等：新型重组糖蛋白表达栽体一盘基网柄茵 第36卷 动物之间具有更近的同源性。 一种在盘基网柄菌生长的稳定期分泌的生长抑制 盘基网柄菌具有横跨单细胞营养生长和多细胞 剂阻加3。通过流加发酵或者固定化培养的方法可 发育状态的生命世代。在单细胞营养生长阶段，即 以部分克服细胞密度低的缺点，使细胞密度相对于