92维生素E对细胞功能影响及机制研究.pdf

不同剂量B-胡萝 卜素和VE对细胞功能影响及机制的研究 摘 要 目的:研究不同剂量B一胡萝 卜素(6一Carotene，B一C)和维生素E(VitamniE，vE) 对人体外周血细胞及体外培养的人脐静脉细胞和大 鼠骨髓干细胞生物学效应的影 响及其作用机制。 方法:人群试验:青年人 188 名，年龄 91一23 岁，其中男性95 人、女性 93 人。随机分为四组，对照组仅给Ev 5m脚 作为安慰剂，其余3组分别给予p一c 16.7m留d、8.35m岁d和55.7m创d，干预时间为8周。补充前后分别获取各组研究对 象外周血红细胞和淋巴细胞，检测红细胞溶血度及淋巴细胞增殖活性。 体外实验:实验对象为传至4一6代的人脐静脉细胞 (TheEndothelialCellof Umbilicalvein，EcuV)和大鼠骨髓干细胞(Bonemarrowstemcell，BMsC)。 )l B一c研究中将细胞分为对照组(A组)、溶剂(DMso)对照组(B组)、华mofL/ 组(c组)、取mol压组 (D组)、如mo/lL组 (E组)、即mol/L组 (F组)、1印mol/L 组 (G组)、3知molL/组 (H组)，共5个组。 2)vE研究中将细胞分为对照组(A组)、溶剂(0.017%CHC13+032%CZ践oH) 对照组 (B组)、1伽molL/组 (c组)、2伽mol几组 (0组)、4助moL/l组 (E组)、 5如rnol/L组 (r组)、16伽mol几组 (0组)、32伽mol几组 (H组)，共5个组。 每组各设6个平行样，作用时间为3天，分别比较细胞生长曲线、细胞增殖活 性、胞内钙离子浓度、acspas3e的表达以及胞内。一2浓度等，以探讨6一c和Ev 对两 种细胞的作用效应与作用机制。 结果:)1人群试验结果:补充e一胡萝 卜素617.mg组淋巴细胞增殖活性由干预 前的 (0.23士0.16)上升至干预后的 (0.30士0.14)，升高了30.4% (P0.05)，与干 预后的对照组 (0.24士0.1)0相比平均升高了250.%(尸00.5)。补充83.sm留d组与 干预前相比，红细胞的溶血度由(44.9士12.2)降至(35.1士12.5)(p0.05)，而16.7m创d 补充组干预前、后红细胞溶血度却未见有明显差异 尸〔0.05)。5.57m酬 组在两实 验结果中均未见明显差异。 2)B一c对体外培养细胞的作用结果:两组细胞生长曲线在补充B一c为3知mo/lL (H组)时受抑制明显，ECUV的抑制更为显著。细胞增殖活性显示，B一C的浓度 在如mol几和枷mo/lL时对两种细胞的增殖活性促进作用最明显，再增加浓度细胞 增殖活性反而开始降低 ，在 H 组活性最低且与其它各组 比较有统计学意义 (P0.05)。 比较胞内钙离子浓度和 caspas3e 的表达发现，相对于其它组，B一c浓度达到 3弄。刀。1压时两种细胞胞浆内钙离子浓度和caPsas3e表达均有显著升高 (P0D.5)， D、E、F组则有所降低，显示出其保护细胞生长的作用。 对胞内以0飞浓度为代表的抗氧化研究发现，低剂量的B-C能起到抗氧化作用， 从低剂量加入B一C(切mo比)开始胞内oz’即降低，虽然在H组又有上升的趋势， 但相比于溶剂对照组仍有降低 (尸》0.05)，所以疑为溶剂作用的结果。 )3Ev 对体外培养细胞的作用结果:细胞外液中Ev 浓度达到32印molL/ (H 组)时两种细胞生长曲线均明显降低伊闭.05)，细胞增殖活性显著减弱，在2伽mol压 (D组)时对ECUV的生长促进作用最高，对BMSC的细胞增殖活性促进作用则 以段种mo呱浓度最大;两种细胞内H组的胞内钙离子浓度与空白和DMso对照组 比较均有明显升高，D组、E组与对照组比较，其胞内钙离子浓度则有明显降低。 对两种细胞的胞内acsp议 3表达的研究也发现，。”pase3的高低与胞内钙离子 浓度变化较一致。两种细胞均在1印m。呱 (C组)、2伽m。比 (D组)胞内-02浓度 显著降低，而Ev 浓度在32切止mol几(H组)时两种细胞内仇浓度则急剧升高，其 中EcUv中-02远高于对照组(P0.05)，在BMsc中H组则只比脚止m。比浓度组 略高 (只刁.05)，但仍低于两对照组仔卜0.05)。 结论:在人群干预试验中，补充不同剂量 卜C可能对青年正常人群产生不同的