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纳米胶体金制备办法纳米材料论文 【摘要】目的利用柠檬酸三钠作为还原剂，制备颗粒均一、分布均匀的纳米胶体金。方法通过考察反应时间、搅拌速度以及初始沸腾时间3个因素来确定最佳的制备条件，以紫外吸收峰、粒径及透射电镜扫描结果进行综合评价。结果胶体金溶液的最佳制备条件为：在200r/min的搅拌速度加热至沸腾，沸腾后立即加入还原剂，反应12min后停止搅拌;所制得的胶体金的粒径为20nm左右。结论采用优化条件所制得的胶体金颗粒均一、分布均匀。 【关键词】胶体金;纳米粒;制备方法;优化条件 胶体金免疫层析法是20世纪90年代在美国兴起的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术，是在现代单克隆抗体技术、胶体金免疫技术和新材料技术基础上发展起来的新型检测技术。 胶体金溶液是指分散相粒子直径在1～150nm之间的金溶胶，属于多相不均匀体系，颜色呈桔红色到紫红色。1971年Faulk和Taylor将胶体金引入免疫化学中[1]，开始作为一种免疫标记技术使用，胶体金在免疫化学中的这种应用，又被称为免疫金，近年来胶体金标记已经发展为一项重要的免疫标记技术[2～3]。 胶体金的制备方法一般采用还原法，常见的有硼氢化钠还原法(2nm)、白磷还原法(5nm)、抗坏血酸还原法(8～12nm)、柠檬酸?谗匪峄乖?法(3～15nm)、柠檬酸三钠还原法[4](10～150nm)，其中柠檬酸三钠法是最经典的方法，其基本原理是向一定浓度的金溶液内加入一定量的柠檬酸三钠使金离子还原变成金原子，其工艺简单，成本低廉，但在实际应用过程中很容易出现颗粒聚集、重复性差等问题，影响胶体金在免疫分析中的应用[5]。据文献报道，保持柠檬酸三钠和氯金酸的摩尔比恒定可初步控制胶体金的粒径范围[6]，但是颗粒的均匀度和分散度却与加热条件及加热时间有密切关系。 本文采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，对影响氯金酸和柠檬酸三钠水溶液反应的几种因素进行优化，选择出最佳的反应时间、沸腾时间以及搅拌速度，并通过紫外吸收峰、透射电镜结果及粒径对所制备的胶体金溶液进行综合评价，为制备胶体金免疫层析检测试纸奠定基础。 1试剂与仪器 1.1试剂 氯金酸(Sigma公司原装进口)、柠檬酸三钠(国药集团化学试剂有限公司)等均为分析纯，使用前未经进一步纯化。实验用水均为经超纯水装置净化的二次去离子水，电阻率18MΩ?cm。 1.2仪器 JJ2000B分析天平[佛兰德(北京)电子有限公司]，SXJQ??1型数显直流无级调速搅拌器(郑州长城科工贸有限公司)，TC??15型恒温加热套(海宁市华星仪器厂)，Spectronic1.70紫外可见光分光光度仪(厦门联信诚有限公司)，JEM??1400透射电镜[日本电子株式会社(JEOL)]，NanoSeriesNano??ZS90型粒度测定仪(英国马尔文仪器有限公司)。 2胶体金溶液的制备 2.1器皿的硅化 将所用器皿用酸液浸泡72h，取出，大量自来水冲洗，蒸馏水浸泡24h,干燥，用含5%的二氯二甲基硅烷的三氯甲烷溶液进行硅化，硅化完成后用双蒸水冲洗多次，烘干。 2.2柠檬酸三钠还原法制备胶体金 取质量浓度0.01%氯金酸水溶液100mL加热至沸，搅拌下加入预热的质量浓度1%柠檬酸三钠水溶液4mL，金黄色的氯金酸水溶液在2min内变为灰色，然后由灰色变为酒红色，继续搅拌煮沸，直至溶液呈透亮的红色，冷却后用双蒸水定容至100mL，4冰箱中避光保存。 2.3制备胶体金条件的优化 分别在200、250、300r/min的搅拌速度下，氯金酸水溶液煮沸0、2min，加入柠檬酸三钠水溶液，煮沸反应10、12min，制得胶体金溶液，然后进行质量鉴定。 2.4胶体金的质量鉴定 2.4.1肉眼观察 观察其颜色、均匀度和透明度。 2.4.2可见光扫描鉴定 将冷却后的胶体金溶液在400～600nm进行扫描，确定最大吸收峰波长，观察最大吸收峰的峰形和峰宽。 2.4.3粒径分布情况 对胶体金颗粒从数量粒度分布、体积粒度分布、强度粒度分布等因素对胶体金的粒径分布情况进行测定分析。 2.4.4透射电镜观察 透射电镜下观察胶体金颗粒的大小、均匀度、有无椭圆形及多角形、有无颗粒的聚集情况。 3结果 3.1制备条件的选取 氯金酸反应液在加热过程中的颜色变化时间随溶液起始沸腾时间和搅拌转速的不同而不同，随着加热时间的延长，溶液颜色变化过程为浅黄色→灰色→浅蓝色→紫红色→橘红色。本实验利用螺旋搅拌器转速的可控性以及加热套温度的可调性，通过改变反应过程中的搅拌速度和氯金酸溶液的初始沸腾时间