乳酸菌高密度培及浓缩型发酵剂研究.pdf

摘 要 乳酸菌下游生物工程技术研究具有重要的理论意义和广阔前景。本文以28株嗜热性 乳酸菌和8株嗜温性乳球菌为研究对象，对乳酸菌生物学特性、高密度培养及浓缩型发 酵剂制备工艺及有关理论、新产品开发等进行了系统研究一结果如下： 嗜热性乳酸菌、嗜温性乳球菌乳糖转运、代谢体系及有关酶类的差别是影响乳酸菌 在牛乳中增殖速度的主要因素。两类乳酸菌最大产酸量、产酸率差异明显。蛋白质分解 活力影响乳酸菌的增殖速度。筛选的LA32菌株具有良好的益生特性。 德氏乳杆菌保加剩皿亚种、乳酸乳球菌乳酸亚种、嗜酸乳杆菌存在23kb的质粒： 28kb的质粒也存在于乳酸乳球菌乳酸亚种中。乳酸菌内源性质粒研究对食品级载体的构 建和优良菌株的分子育种具有重要意义。 以乳酸菌生物学特性和单因子试验为基础，设计出乳酸菌高密度增殖培养基——新 型pH值内控型乳清基质培养基，营养均衡，缓冲能力强，乳酸菌比生长速率较大，优 9218 于MRS培养基和牛乳培养基，为O h-1，德氏乳杆菌保加利亚亚种的最短代时为 3879min。 选用Logisticequation作为茵体细胞生长的动力学模型，研究得出： 德氏乳杆菌保加利亚亚种菌体分批培养的动力学方程为： 2503／3628)(1．eo Cxf订；O2503·eo3”，(1．(0 3847‘)) 乳酸乳球菌乳酸亚种菌体分批培养的动力学方程为： 2472·eo2”V(1．(O2472／2128)(1．eo2”。)) Cx(t)=0 为进一步放大试验和工业化生产以及优化培养工艺提供了理论模型。 培养温度为42C时．唾液链球菌嗜热亚种、嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种 5649、o5260、O593l 的比生长速率分别为O h～：培养温度为30℃时，乳酸乳球菌乳酸 亚种、乳酸乳球菌乳酸亚种丁二酮变种、乳酸乳球菌乳油亚种的比生长速率分别为 o 2534、O 4770、O 2765 h11：接种量大，菌体的生物量增量大，比生长速率降低：摇瓶 培养中溶解氧增大，乳酸菌生物量增量减小，进行乳酸菌培养时，不宜采用搅拌操作。 选择培养基起始pH值、培养时间和培养温度三因素进行分批培养条件的优化，所 得模型的实际值方程为： 2404+9 0272 0211 x1+10836№+20864x3—0．0093 x32 y=．77 X22．0 x2xz-O．0164 生物量在5 76 0以上的培养条件为：培养基起始pH值为69、培养时问为18以lh、 暗养温度为37--39．c。 研究了最新发酵技术对乳酸菌高密度培养的影响。与常规培养相比，等pH值培养 技术一定程度上克服了因pH值下降、乳酸积累而引起的酸损伤，菌体密度较高。嗜酸 乳丰于菌在pH5，5进行恒定pH值培养，菌数可达到389×109efu／mL。理论分析表明：在 单一补料分批培养的准恒定状态下，稀释率与比生长速率基本相同，即u—D。采用全 营养物质的连续流加法，在对数生长末期进行补料操作，确定起始培养基流加速率为 5874Z 104m3／h。德氏乳杆菌保加利亚亚种的菌体密度可达10×1010efia／mL。 型塑垦 塑 要 !!婴j：．：旦 首次采用先进的微滤技术浓缩乳酸菌液，结果表明：微滤浓缩、超滤浓缩、离心浓 X 79 l、