液相色谱－串联质谱法测定饲料中孔雀石绿及其代谢物残留量.pdfVIP

维普资讯 《嗣斟工业》2·008年第29簋第 1O期 检 测 液相色谱 一串联质谱法测定饲料中 孔雀石绿及其代谢物残留量 应永飞 朱聪英 韦敏珏 李 兰 索德成 周文海 林仙军 摘 要 建立 了液相色谱一串联质谱法同时测定饲料 中孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿含量 的方法。采用乙腈提取试样中的药物，经中性氧4Leg柱和阳离子交换柱净化后，进行液相色谱一串联质 谱法测定，分别以D一孔雀石绿和 D一隐性孔雀石绿为内标进行定量分析：孔雀石绿和 隐性孔雀石绿 的检测限(L0D)均为0．5I~g／kg，定量限(L0Q)均为 1．0I~g／kg，在0．25-40．0I~g／l的范围内，线性相关系数 r均在 0．999以上，加标浓度在 1、0～100~Ig／kg范围内，回收率在 79．2％～117．0％之间，相对标准偏差≤ 7．7％。本方法可快速测定饲料 中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量，操作简单 ，灵敏度高，结果准确性 高，能满足 日常检测需要。 关键词 液相色谱一串联质谱法；孔雀石绿 ；隐性孔雀石绿 中图分类号 S816．17 在水产养殖过程中，人们经常使用各种药物进行 留现象，其残留时间也较长 由于其化学官能团 苯 甲 水体消毒和防止病害 ，孔雀石绿就是其中一种染料类 烷是一种致癌物质，所 以美国、日本 以及英国等许多围 杀菌剂。它是一种具有金属光泽的绿色晶体，溶于水 、 家已禁止用于水产养殖业。目前．我国农业行业标准无 乙醇和 甲醇 ，水溶液的颜色为蓝绿色 ，其结构见图 1。 公害食 品渔用药物使用准则中已将孔雀石绿列为禁 孔雀石绿在细胞分裂时阻碍蛋白肽的形成 ，使细胞内 用药物 。然而，由于 以前我国未对水产品中的孔雀石绿 的氨基酸无法转化为蛋 白肽 ，细胞分裂受到抑制 ，从 残留进行控制．致使水产品中孔雀石绿残留的现象较 而产生抗菌杀虫作用。近年来发现孔雀石绿特别是其 为严重，以这种水产品等为原料制备的饲料往往存在 代谢物——隐性孔雀石绿在水产品体 内有明显 的残 孔雀石绿及其代谢物残留，从而导致了重复污染。 目前 ，我国对于水产品中孔雀石绿及其代谢物的 检测方法 ，主要有液相色谱法和液相色谱一质谱法 ，【 应永飞，浙江省兽药饲料监察所，310020，杭州市凤起 东 检测对象均为水产品，但没有饲料 中孔雀石绿的检测 路 29号。 方法标准。国内外也只有水产品中孔雀石绿及其代谢 朱聪英、韦敏珏、周文海、林仙军，单位及通讯地址同第一 物的检测方法 【】，因此对饲料 中孔雀石绿的检测方法 作者： 李兰、索德成，国家饲料质量监督检验中心。 进行研究具有非常重要的意义。在大量实验摸索T作 收稿 日期 ：2008—04—14 的基础上，对饲料中孔雀石绿的检测采用液相色谱一 抗量呈正比，与待测样品中相应的药物量呈反 比。采 水平的复杂基质，不同检测手段所得到的定性结果差 用酶联免疫试剂盒检测水产品中孔雀石绿的特点是 ： 异较大，单四极杆和离子阱质谱测定结果较难确证 ， 检测速度快 ，2～3h就可检测一批样品；灵敏度高 ，在 而串联四极杆和飞行时间质谱的检测结果较可靠 但 鱼 、虾中检测灵敏度可达到0．叭 kg。该方法特别适 采用高压液相色谱和液相色谱一质谱联用检测孔雀石 合大批量样品的筛选。虽然 ELISA法的抗原和抗体结 绿残留，过程复杂 ，检测周期长 ，且检测过程会产生有 合有较强的选择性 ，但水产品的种类繁多 ，基质复杂， 机废液污染环境 。因此 ，应加快研究开发酶联免疫法 、 检测结果的假阳性几率高。因此，用该方法检出的阳 免疫胶体金等快速检测方法 ，并建立相应