溆浦鹅肌肉生成抑制因子基因（MSTN）的克隆及其表达量与日粮能量、血清IGF-I和GH的关系研究.pdfVIP

维普资讯 畜牧兽医学报 2008，39(5)：582—587 ActaVeterinariaetZootechnicaSinica 溆浦鹅肌 肉生成抑制因子基 因(MSTN)的克隆及其 表达量与 日粮能量 、血清 IGF-I和 GH 的关系研究 胡骏鹏，何瑞国 ，范卫星，曹爱青 (华 中农业大学动物科技学院，武汉 430070) 摘 要 ：从淑浦鹅(Xupugeese)的腿肌 中抽提总 RNA，用两步法 RT_PcR扩增出MSTN基 因的cDNA编码序列， 以pGEM-TVector为载体 ，将该片段克隆到大肠杆菌(Escherichiacoli)中。通过筛选 阳性克隆，双酶切鉴定后测 序 ；以MSTN基 因的克隆为基础 ，以fl-actin为 内标 ，构建优化 的半定量 RT—PCR方法 ，研究高、中、低 (A：13．38 MJ／kg、B：12．13MJ／kg、C：10．87MJ／kg)3种不同能量对淑浦鹅 21和 70日龄 2个时期肌 肉组织 MSTN基 因表达 的差异 ；同时用放免法测定 21、70日龄的血清 GH和 IGF-I浓度 。结果表 明：克隆的淑浦鹅 MSTN基 因cDNA 的 部分序列，其片段大小为 1128bp，编码 375个氨基酸组成 的多肽 ，淑浦鹅与鸡 、鸭、朗德鹅 的核苷酸相似性分别为 94 、94 、99 ；推导氨基酸的相似性分别为 98 、97 、98 。21日龄时，日粮能量水平对淑浦鹅 MSTN表达 量 的影响不显著 ；70日龄时淑浦鹅 MSTN 的表达量为 cBA。对于淑浦鹅 21～70日龄阶段 的生长 ，MSTN 基 因的表达量和血清 IGF-I的变化趋势基本一致 ；与血清 GH含量之间并不存在很大关联 ，日粮能量对 21日龄后淑 浦鹅 MSTN基 因的表达有影响。本研究为 MSTN基因在水禽 中的进一步研究和应用打下了基础 。 关键词 ：淑浦鹅 ；MSTN；肌肉组织 ；半定量 RT—PCR；IGF-I；GH 中图分类号 ：$835．2 文献标识码 ：A 文章编号 ：0366—6964(2008)05—0582—06 CloningofM STN GeneandResearch ofRelationshipbetweenM STN Gene ExpressionandDifferentEnergyDietsorIGF—I．GH in Serum ofXupuGEESE HU Jun—peng，HERui—guo ，FAN Wei—xing ，CAO Ai—qing (CollegeofAnimalScienceandTechnology，Huazhong AgriculturalUniversity，Wuhan430070，China) Abstract：GenomeRNA wasextractedfrom legmuscleofXupu geese，M STN genemRNA was amplifiedbyusingRT—PCR，thePCR productwasclonedintopGEM—T vector．TheM STN gene wasisolatedand sequenced from thepositiveclonesscreenedbasedon theM STN geneclone， using~actinasinnercontrol，constructinganoptimalsemi—quantitativeRT—PCRmethod，the differenceofM STN geneexpressionat21and70daysbyfeeding differentenergydiets，atone timewedetectedIGF—IandGH in serum．TheuniqueDNA fragmentabout1 128bp i