免疫复合物在prsv-ade作用中的研究.pdfVIP

中文摘要 and 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PorcineReproductiveRespiratorySyndromevirus，PRRSV) 是能够引起猪繁殖与呼吸综合征(Porcine and ReproductiveRespiratorySyndrome。PRRS)的一 种具有传染性的病毒，该病毒主要造成仔猪呼吸障碍和母猪流产。PRRSV易变异，是单股 正链RNA病毒，可引起猪的持续性感染和免疫抑制，具有抗体依赖性增强作用 (Antibody-dependent 的防治具有重要意义。FcY II R可分为激活型和抑制型两种，而FclrRB是目前发现的唯一 的抑制型的受体，在天然免疫和适应性免疫反应中发挥调节作用。本研究通过研究免疫复合 节作用机制提供理论依据。 本研究以不同浓度非感染性免疫复合物分别处理猪肺泡巨噬细胞(PAM细胞)，经 SYBRGreen PRRSV感染48h后用已建立的PRRSVI实时定量PCR方法检测感染细胞中 病毒RNA。结果显示，当非感染性免疫复合物作4倍和8倍稀释时，PRRSV的复制水平 较病毒感染组略为升高，说明免疫复合物能经FcTR以非剂量依赖性方式增强PRRSV复制。 度的非感染性免疫复合物与病毒的混合物感染PAM细胞48h后用同样的方法检测感染细胞 B被封闭的情况 中病毒RNA。结果显示，2倍(2．635mg／mL)稀释的免疫复合物在FeaRII 下同样能明显的促进病毒增殖，表明免疫复合物可通过激活型FeaR增强病毒复制。在上 述试验基础上，又选择4倍稀释的免疫复合物(1．30mg／mL)分别于感染前、感染后、或 染细胞中病毒RNA。结果显示，非感染性免疫复合物在感染12，24和36h时间段内均能 明显促进病毒的增殖，但在48h后不显著。说明免疫复合物在感染36小时内促进病增殖效 果最强。 平，但和正常细胞相比没有明显差异，而TNF-a的mRNA水平较正常细胞略为升高。本试 验以4倍稀释的免疫复合物分别于感染前、感染后、或与病毒同时来处理PAM细胞，用相 mRNA水平，但在36h前没有明显规律，而在各时问段内，均能降低IL一10的mRNA水平。 说明免疫复合物经FcTR调节PRRSV诱导的细胞因子转录没有明显规律，这可能是因为免 疫复合物同时能与激活型和抑制型FcTR结合造成的。 36h和48h后用实时定量PCR方法检测感染细胞中病毒RNA，同时用相对荧光定量 显示，在感染12和24h时间段内，封闭组中病毒复制水平略低于病毒感染组，但差异不显 著。而在感染36h时间段内，病毒的复制水平明显升高，但在48h时间段内，病毒的增殖与 病毒感染组相比变化不明显。说明Fc丫RIIB的选择性激活对PRRSV增殖的影响表现为先抑 制后促进。同时在病毒感染各时间段内，封闭组中IFN-n和TNF．ⅡmRNA水平均高于病毒 感染组，而IL一10的mRNA水平则明显下降，且显著低于病毒感染组。说明FeTRIIB的选 择性激活在PRRSV感染的免疫反应中能增强抗病毒因子的水平。以上结果也说明PRRSV 在细胞内增殖可能并不完全与细胞内抗病毒因子的水平直接相关，这暗示PRRSV在PAM 细胞内复制存在更复杂的作用机制。 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒；荧光定量PCR；非感染性免疫复合物；抗体依赖性增 强作用；Fc／R： 2 THEEFFECTSoF IMMUNECoMPLEXoNADEoFPRRSV INFECTIoN Supervisor：Pro￡XiaPing’an Master Yina Candidate：Zhang Abstract： Porcine